[发明专利]新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂及其制备方法与应用在审
申请号: | 202010789377.5 | 申请日: | 2020-08-07 |
公开(公告)号: | CN111992186A | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 向思琪;张磊;王业富 | 申请(专利权)人: | 武汉瑞法医疗器械有限公司 |
主分类号: | B01J20/24 | 分类号: | B01J20/24;B01J20/28;B01J20/30;A61M1/16 |
代理公司: | 武汉卓越志诚知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42266 | 代理人: | 戴宝松 |
地址: | 443020 湖北省武汉市*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺炎 病毒 受体 ace2 亲和 吸附剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂,其特征在于:所述新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂包括琼脂糖载体微球和结合在所述载体微球表面的新冠肺炎病毒受体ACE2序列对应的单链脱氧核糖核酸;所述载体微球表面经过氨基修饰,所述新冠肺炎病毒受体ACE2适配体表面经过羧基修饰,所述载体微球表面的氨基与所述新冠肺炎病毒受体ACE2适配体表面的羧基通过酰胺反应形成稳定的酰胺键。
2.根据权利要求1所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂,其特征在于:所述载体微球为琼脂糖凝胶微球,所述新冠肺炎病毒受体ACE2适配体为新冠肺炎病毒受体ACE2单链脱氧核糖核酸适配体。
3.根据权利要求2所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂,其特征在于:所述新冠肺炎病毒受体ACE2单链脱氧核糖核酸适配体中,扩增所述新冠肺炎病毒受体ACE2单链脱氧核糖核酸的片段为108个碱基,序列如下:CATTGGAGCAAGTGTTGGATCTTGTATGGAATATGGATGGATCACTTGTAAGGACAGTGCCTGGGAACTGGTGTAGCTGCAAGGATTGAGAATGGCATGCATTAGCTC。
4.一种权利要求1至3任一项权利要求所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1,制备所述新冠肺炎病毒受体ACE2适配体,然后对所述新冠肺炎病毒受体ACE2适配体表面进行羧基化功能修饰,得到羧基化ACE2适配体,最后配制成预定浓度的羧基化ACE2适配体溶液,保存备用;
S2,制备琼脂糖凝胶微球,并对所述琼脂糖凝胶微球表面进行氨基化改性修饰,得到氨基化载体微球;
S3,按预定比例,将步骤S2制备的所述氨基化载体微球加入到EDC-NHS活化剂中,充分悬浮搅拌10~20min后,然后室温下加入步骤S1制备的所述羧基化ACE2适配体溶液,得到混合反应溶液,充分反应2~6h,所述羧基化ACE2适配体与所述氨基化载体微球充分偶联,所述羧基化ACE2适配体表面的羧基和所述氨基化载体微球表面的氨基发生酰胺反应,形成稳定的酰胺键;
S4,反应结束后,离心洗涤,除去多余的所述EDC-NHS活化剂和所述羧基化ACE2适配体,制备得到所述新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂。
5.根据权利要求4所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:在步骤S1所述羧基化ACE2适配体溶液中,羧基化ACE2适配体的浓度为0.5-3.5ng/μL。
6.根据权利要求4所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:在步骤S3所述EDC-NHS活化剂中,MES:EDC:NHS的质量比例为(40-70):(4-8):(1-6),所述MES的质量浓度为60mg/mL。
7.根据权利要求4所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:在步骤S3中,所述氨基化载体微球与所述EDC-NHS活化剂的质量体积比例为(60-150)mg:(7-12)mL;所述混合反应溶液中,所述羧基化ACE2适配体的浓度为0.5-3.5ng/mL。
8.根据权利要求6至7任一项权利要求所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:在步骤S3中,所述EDC-NHS活化剂中,MES:EDC:NHS的质量比例为(50-60):(5-7):(2-5);所述氨基化载体微球与所述EDC-NHS活化剂的质量体积比例为100mg:10mL;所述混合反应溶液中,所述羧基化ACE2适配体的浓度为01.0-1.5ng/mL。
9.根据权利要求6至8中任一项所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法,其特征在于:所述EDC-NHS活化剂中,MES:EDC:NHS的质量比例为58:6:4;所述羧基化ACE2适配体的浓度为1.0ng/mL。
10.一种权利要求1至3所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂或者权利要求4至9所述的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的制备方法制备得到的新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂的应用,其特征在于:所述新冠肺炎病毒受体ACE2亲和吸附剂在新冠病毒免疫吸附领域的应用。
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