[发明专利]一种猪蓝耳病亚单位疫苗及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码所述融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

2.一种融合蛋白的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.含有权利要求2所述的编码基因的生物材料，所述生物材料包括重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、噬菌体载体、病毒载体或工程菌。

4.权利要求1所述的融合蛋白或权利要求2所述的编码基因或权利要求3所述的生物材料在制备猪蓝耳病亚单位疫苗中的应用。

5.猪蓝耳病亚单位疫苗，其特征在于，所述猪蓝耳病亚单位疫苗的有效成分为权利要求1所述的融合蛋白。

6.权利要求5所述的猪蓝耳病亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，包括将权利要求1所述的融合蛋白与佐剂混合的步骤。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述融合蛋白的制备方法包括：

(1)将PRRSV NADC30-like毒株的ORF5全长基因序列进行密码子优化；

(2)将去除DomainⅢ结构域的绿脓杆菌外毒素A的基因序列与优化后的所述ORF5全长基因序列串联，加His标签和酶切位点，合成所述融合蛋白的基因序列。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述融合蛋白的制备方法还包括：

(3)将合成的所述融合蛋白的基因序列连入昆虫杆状病毒表达载体中，转化大肠杆菌感受态，提取重组穿梭载体；

(4)将提取的所述重组穿梭载体转染到昆虫细胞中，获得重组杆状病毒；

(5)将获得的所述重组杆状病毒接种于昆虫细胞中，收获并纯化目的蛋白。