[发明专利]嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明提出了一种嵌合抗原受体。该嵌合抗原受体包括：胞外区，所述胞外区包括单链抗体的重链可变区和轻链可变区以及CD8铰链区，所述单链抗体特异性识别抗原；跨膜区，所述跨膜区包括免疫共刺激因子跨膜区；以及胞内区，所述胞内区包括免疫共刺激因子胞内段以及CD3ζ链。根据本发明实施例的嵌合抗原受体能够特异性识别表达特异性抗原的肿瘤细胞，实现对高表达特异性抗原的肿瘤细胞的特异性杀伤。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体地，本发明涉及嵌合抗原受体及其应用，更具体地，本发明涉及嵌合抗原受体、表达所述嵌合抗原受体的转基因淋巴细胞、构建体、慢病毒、制备所述转基因淋巴细胞的方法、治疗癌症的治疗组合物以及一种提高淋巴细胞治疗安全性、有效性或持久性的方法。

背景技术

肿瘤可以避免免疫监视，肿瘤细胞通过诱导免疫抑制性受体的表达，而关闭其受到免疫反应。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)是将能识别某种肿瘤抗原的抗体可变区与共刺激结构、CD3蛋白偶联构成一个表达在T细胞上的嵌合蛋白，可以特异性的识别和杀伤肿瘤靶细胞，CAR-T借助T细胞的杀伤和抗体的靶向作用，使针对肿瘤细胞的杀伤更加准确和快速，已在血液瘤的治疗领域取得显著效果，是目前发展迅速的个性化肿瘤治疗方案。但在应用中CAR-T也存在一定的问题，改善和解决目前CAR-T治疗中存在的问题是未来CAR-T治疗发展的关键。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

目前嵌合抗原受体基因修饰T细胞疗法(CAR-T)治疗中存在复发率高、细胞因子炎症高、持续性差等问题，有时甚至会出现神经毒性等。

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。本申请的发明人在现有CAR-T的基础上，设计了一种新的嵌合抗原受体(CAR)的免疫共刺激因子串联结构。惊喜地发现，具有该串联结构CAR的CAR-T细胞可以有效的减少CAR-T细胞炎症因子的自释放，提高深层记忆T细胞的比例(TCM)，并且能够模拟正常T细胞的免疫刺激激活功能，从而有望解决现有技术中CAR-T治疗中存在的问题。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种嵌合抗原受体。根据本发明的实施例，所述嵌合抗原受体包括：胞外区，所述胞外区包括单链抗体的重链可变区和轻链可变区以及CD8铰链区，所述单链抗体特异性识别抗原；跨膜区，所述跨膜区包括免疫共刺激因子跨膜区；以及胞内区，所述胞内区包括免疫共刺激因子胞内段以及CD3ζ链(CD3 zeta)。根据本发明实施例的嵌合抗原受体能够特异性识别表达特异抗原的肿瘤细胞，实现对高表达特异抗原肿瘤细胞的特异性杀伤。

根据本发明的实施例，上述嵌合抗原受体还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，免疫共刺激因子跨膜区为CD8跨膜区；所述免疫共刺激因子胞内段为4-1BB胞内段以及ICOS或OX-40胞内段。

根据本发明的实施例，免疫共刺激因子跨膜区为ICOS跨膜区；所述免疫共刺激因子胞内段为4-1BB胞内段以及ICOS胞内段。

根据本发明的实施例，免疫共刺激因子跨膜区为OX40跨膜区；所述免疫共刺激因子胞内段为4-1BB胞内段以及OX40胞内段。

发明人通过实验发现，在不同的免疫共刺激因子跨膜区以及不同的免疫共刺激因子胞内段的组合下，对嵌合抗原受体的表达滴度、表达嵌合抗原受体的免疫细胞的杀伤效果以及细胞炎症因子的释放均有显著影响。