[发明专利]一种红茶中人为添加合成着色剂的检测方法

权利要求书

1.一种红茶中人为添加合成着色剂的检测方法，其特征在于：

包括如下步骤：

1)：试样制备

1.1)：茶叶：将茶样倒入样品盘内，用四分法取样约50g，置于粉碎机，称取5g磨碎样品，放入100mL烧杯中，加超纯水30mL，得到样品溶液，若样品溶液pH高于6，用柠檬酸溶液调pH到6；

2)：色素提取

2.1)：步骤1.1得到的样品溶液在60℃水浴锅上加热溶解；

2.3)：吸附：将1g聚酰胺粉加入2mL超纯水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌，以G3垂融漏斗抽滤；

2.4)：用60℃，pH为4的水洗涤5次，每次约5mL；

2.5)：用甲醇-甲酸溶液洗涤5次，每次约5mL；

2.6)：用超纯水洗涤3次以上，每次30mL，使抽滤瓶中溶液为中性；

2.7)：弃去抽滤瓶中溶液，并用纯水将其润洗3次；

2.8)：解吸：用乙醇-氨水溶液-水溶液洗涤5次，每次约5mL，使色素完全解吸；

2.9)：浓缩：收集解吸液，加乙酸中和后，放置在水浴锅上蒸发；

2.10)：加超纯水溶解，定容至5mL，用0.45μm水系滤膜过滤到样品瓶中；

2.11)：重复步骤1、以及步骤2.1～步骤2.10，每批制备一个平行样；

3)：质控样品制备

3.1)：方法空白：取30mL超纯水于100mL烧杯中，重复步骤2.1～步骤2.10，不加样品；

3.2)：质量控制溶液：取500μL浓度为50μg/mL合成着色剂混合工作液于100mL烧杯中，再加30mL超纯水，重复步骤2.1～步骤2.10，得到合成着色剂的加标浓度为5μg/mL的质量控制溶液，不加样品；

3.3)：样品加标溶液：取500μL浓度为50μg/mL合成着色剂混合工作液，于经过步骤1处理的样品溶液中，重复步骤2.1～2.10，得到合成着色剂的加标浓度为5μg/mL的样品加标溶液；

4)：仪器分析

4.1)：建立仪器测试条件

4.2)：运行标准曲线溶液，用峰面积和浓度建立校准曲线，线性相关系数不得小于0.9990；

4.3)：测试方法空白检查是否有污染；

4.4)：测试质量控制溶液检查回收率；

4.5)：测试样品溶液及平行样；

4.6)：测试样品加标溶液，用于定性和检查回收率；

4.7)：通过样品峰和标准品峰的保留时间比较，进行定性分析；

4.11)：用目标化合物的峰面积进行定量；

5)：质量控制

6)：结果计算与评估

6.1)：试样中着色剂含量按下式计算)：

式中)：

X——试样中着色剂的含量，单位mg/kg；

c——进样液中着色剂的浓度，单位μg/mL；

V——试样稀释总体积，单位mL；

m——样品称量重量，单位g；

1000——单位换算系数。

2.如权利要求1所述的一种红茶中人为添加合成着色剂的检测方法，其特征在于：在步骤2.1后具有步骤2.2：若经过步骤2.1处理后的样品溶液混浊，则使用离心机进行离心除杂，离心管50mL，转速5000rpm/min，离心时间5min。

3.如权利要求1所述的一种红茶中人为添加合成着色剂的检测方法，其特征在于：所述甲醇为色谱纯；超纯水为18.25MΩ；；冰醋酸为AR级；甲醇为AR级；甲酸为AR级；无水乙醇为AR级；乙酸铵为AR级；柠檬酸为AR级；氨水为含量20％～25％；聚酰胺粉为过200目筛；

所述乙酸铵溶液为称取1.54g乙酸铵，加超纯水溶解，定容至1000mL，经0.45μm滤膜过滤；氨水溶液为量取氨水2mL，用超纯水定容至100mL，混匀；乙醇-氨水溶液-水溶液为量取无水乙醇70mL，氨水溶液20mL，超纯水10mL，混匀；甲醇-甲酸溶液为量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀；柠檬酸溶液为称取20g柠檬酸，加超纯水溶解，定容至100mL，摇匀；pH 6的水为向超纯水中滴加柠檬酸溶液至pH至6；pH 4的水为向超纯水中滴加柠檬酸溶液至pH至4；

所述合成着色剂混合工作液为分别移取浓度为1.00mg/mL的胭脂红、诱惑红、苋菜红、亮蓝、日落黄、柠檬黄标准溶液各500μL于10mL容量瓶中，使用pH 6的水定容，混匀，配得每个合成着色剂浓度均为50μg/mL的混合工作液；

所述标准曲线溶液为用50μg/mL混合工作液配制标准曲线溶液，使用pH 6的水定容，混匀。