[发明专利]抗缪勒氏管激素测定试剂盒、制备方法及检测方法

权利要求书

1.一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，包括反应物质，所述反应物质包括检测线荧光偶合物及质控线荧光偶合物，所述检测线荧光偶合物含有荧光微球标记的抗缪勒氏管激素单克隆抗体，所述质控线荧光偶合物含有荧光微球标记的鸡IgY抗体、兔IgG抗体或鼠IgG抗体中的一种。

2.根据权利要求1所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述反应物质由检测线荧光偶合物及质控线荧光偶合物在冻干保护液的保护下经过冷冻干燥制成。

3.根据权利要求1所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述荧光微球为时间分辨荧光微球，所述时间分辨荧光微球包埋稀土离子，同时所述时间分辨荧光微球表面修饰有氨基、羧基或羟基中至少一种功能基团；所述稀土离子选自镧系元素中Sm钐、Eu铕、Gd钆、Tb铽、Dy镝中的至少一种。

4.根据权利要求2所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述冻干保护液含有保护蛋白、糖类的缓冲液；所述缓冲液选自磷酸盐、硼酸盐或Tris缓冲液中的至少一种，浓度为10mM-50mM；所述的保护蛋白选自牛血清白蛋白，卵清蛋白或酪蛋白中的至少一种，浓度为0.1％-3％；所述糖类选自海藻糖、蔗糖、乳糖中的至少一种，浓度为0.1％-10％。

5.根据权利要求1所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括试剂卡，所述试剂卡包括壳体及试纸条，所述试纸条包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫及背衬板，所述硝酸纤维素膜贴在所述背衬板上，所述样品垫和所述吸水垫的一端分别搭接于所述硝酸纤维素膜的两端，所述硝酸纤维素膜上设有检测线与质控线，所述检测线与质控线相互平行，且质控线位于硝酸纤维素膜上靠近吸水垫的一端，所述检测线包被有抗缪勒氏管激素单克隆抗体，所述质控线包被有羊抗鸡IgY抗体、羊抗兔IgG抗体或羊抗鼠IgG抗体中的一种，所述壳体包括能相互扣合的上盖和下盖，所述上盖对应所述硝酸纤维素膜的位置设有显示窗，对应所述样品垫的位置设有加样孔。

6.根据权利要求1所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括反应缓冲液，所述反应缓冲液包括表面活性剂、糖类、防腐剂、氯化钠及缓冲液；

所述表面活性剂选自曲拉通x-100、吐温20、S16、S9中的至少一种，浓度为0.1％-1％；所述糖类选自海藻糖、蔗糖、乳糖中的至少一种，浓度为0.1％-10％；所述NaCl的浓度为0.8-2％；所述防腐剂选自山梨酸、苯甲酸或proclin300中的至少一种，浓度为0.01％-0.1％；所述缓冲液选自磷酸盐、硼酸盐或Tris缓冲液中的至少一种或几种，浓度为10mM-50mM。

7.根据权利要求2所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述反应物质的制备方法，包括如下步骤：

1)活化荧光微球；

2)荧光微球与交联剂交联；

3)荧光微球与抗缪勒氏管激素单克隆抗体反应，得到检测线荧光偶合物；

4)荧光微球与鸡IgY抗体、兔IgG抗体或鼠IgG抗体中的一种反应，得到质控线荧光偶合物；

5)用冻干保护液分别将检测线荧光偶合物与质控线荧光偶合物稀释，配制成反应物质溶液；

6)将反应物质溶液分装在塑料试管中，冷冻干燥，得反应物质。

8.根据权利要求7所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述步骤2)中交联剂包括EDC和Sulfo-NHS，EDC终浓度为0.04％-0.2％，Sulfo-NHS终浓度为0.12％-0.6％。

9.根据权利要求7所述的抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述步骤5)中冻干保护液将检测线荧光偶合物稀释100至1000倍，冻干保护液将质控线荧光偶合物稀释500至2000倍。

10.一种用于检测抗缪勒氏管激素的定量检测方法，其特征在于，采用权利要求1-9中任一项所述的试剂盒，包括以下步骤：

步骤A：将冷藏保存的反应物质和反应缓冲液在室温放置，使其充分平衡；

步骤B：吸取反应缓冲液放入反应物质试管，并立即吸取全血、血清或血浆加入装有反应缓冲液的反应物质试管中,得样本混合液；

步骤C：盖上反应物质试管盖子，摇晃使样本混合液充分混匀；

步骤D：吸取样本混合液，加到试剂卡的加样孔中，反应；

步骤E：将反应后的试剂卡插入荧光免疫分析仪中，进行结果读取。