[发明专利]一种检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，包括末端脱氧核糖核苷酸转移酶，生物素标记的dCTP，阳性探针与阴性探针，细胞裂解液，链霉亲和素磁珠，杂交液，蛋白酶K及其缓冲液，洗液，无RNA酶水，DNA洗脱液，蛋白洗脱液。

2.根据权利要求1所述检测RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述的阳性探针为TERC探针，阴性探针为LacZ探针，探针序列如下：

(1)TERC探针1的核苷酸序列:5’-CAGGCCCACCCTCCGCAACC-3’

(2)TERC探针2的核苷酸序列:5’-GCAAAAGCACGGCGCCTACG-3’

(3)TERC探针3的核苷酸序列:5’-CTCTAGAATGAACGGTGGAA-3’

(4)TERC探针4的核苷酸序列:5’-GCCTCCAGGCGGGGTTCGGG-3’

(5)TERC探针5的核苷酸序列:5’-GGCTGACAGAGCCCAACTCT-3’

(6)LacZ探针1的核苷酸序列：5’-GCCACATATCCTGATCTTCC-3’

(7)LacZ探针2的核苷酸序列：5’-TCATCGATAATTTCACCGCC-3’

(8)LacZ探针3的核苷酸序列：5’-GAAGCAGAACAACTTTAACG-3’

(9)LacZ探针4的核苷酸序列：5’-GTATCGCTGGATCAAATCTG-3’

(10)LacZ探针5的核苷酸序列：5’-GCTGATCCTTTGCGAATACG-3’。

3.根据权利要求1所述检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述裂解液的配方包括如下原料：

1～1.5％(W/V)SDS

Tris-Cl 50～100mmol/L

EDTA 10～15mmol/L

PMSF 0.8～1.2mmol/L；

所述Tris-Cl的PH值为7.0～7.5。

4.根据权利要求1所述检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述杂交液的配方包括如下原料：

1～1.5％(W/V)SDS

15～20％(V/V)formamide

NaCl 500～750mmol/L

Tris-Cl 50～100mmol/L

EDTA 1～2mmol/L

PMSF 0.8～1.2mmol/L

所述Tris-Cl的PH值为7.0～7.5。

5.根据权利要求1所述检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述蛋白酶K缓冲液的配方包括如下原料：

0.3～0.8％(W/V)SDS

NaCl 100～150mmol/L

Tris-Cl 10～20mmol/L

EDTA 1～2mmol/L

所述Tris-Cl的PH值为两个范围，提取RNA时，Tris-Cl的PH值为7.0～7.5；提取DNA时，Tris-Cl的PH值为8.0～8.5。

6.根据权利要求1所述检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述洗液的配方包括如下原料：

0.3～0.8％(W/V)SDS

NaCl 300～400mmol/L

柠檬酸钠30～40mmol/L。

7.根据权利要求1所述检测体内RNA与DNA及蛋白互作的试剂盒，其特征在于，所述DNA洗脱液的配方包括如下原料：

0.8～1.2％(W/V)SDS

NaHCO3 50～80mmol/L。