[发明专利]一种快速检测AKK菌的荧光定量PCR引物组、试剂盒及其应用在审
申请号: | 202010801007.9 | 申请日: | 2020-08-11 |
公开(公告)号: | CN111996267A | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 黄仁慧;郭筱璐 | 申请(专利权)人: | 康美华大基因技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11 |
代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 杨艳 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区西*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 akk 荧光 定量 pcr 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种快速检测AKK菌的荧光定量PCR引物组,其特征在于,包括正向引物和反向引物;所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
2.权利要求1所述的引物组在制备检测AKK菌的荧光定量PCR试剂或试剂盒方面的应用。
3.一种快速检测AKK菌的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物组;其中,正向引物和反向引物的体积比为1:1。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括SYBR Green Reaction Mix、ROX和无菌水。
5.权利要求4所述的试剂盒在临床或科研检测AKK菌中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
S1:提取样本的基因组DNA;
S2:将所述基因组DNA放入PCR反应管中,并向管中加入引物组、SYBR Premix Ex Taq、ROX和无菌水,进行PCR扩增和熔解曲线测定。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增的反应条件为:95℃5min;95℃15s,60℃30s,40个循环。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述熔解曲线测定的条件为:95℃1min,冷却至55℃,然后再升温至95℃;整个过程收集荧光信号。
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