[发明专利]木霉菌Azaphilones类次级代谢产物的应用在审
申请号: | 202010806890.0 | 申请日: | 2020-08-12 |
公开(公告)号: | CN111944840A | 公开(公告)日: | 2020-11-17 |
发明(设计)人: | 沈其荣;张建;庞冠;于振中;李荣 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N15/66;C12N15/65;C12N15/31;C12N1/15;C12P17/12;C12R1/885 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉菌 azaphilones 次级 代谢 产物 应用 | ||
1.一种重组表达质粒,其特征在于将以hph为筛选标记,Pcdna1为强启动子过量表达tgaza5的重组表达质粒。
2.根据权利要求1所述的重组表达质粒,其特征在于所述的重组质粒通过以下方法构建得到:
以保藏号为CGMCC No.3308的SQR-T037的cDNA为模板,用引物tgaza5-cds-F:SEQ IDNO.1和tgaza5-cds-R SEQ ID NO.2扩增转录因子tgaza5编码序列;以SQR-T037基因组DNA为模板,用引物tgaza5-ter-F:SEQ ID NO.3和tgaza5-ter-R:SEQ ID NO.4扩增终止子;扩增产物经确认纯化后采用ClonExpress MultiS One Step Cloning Kit进行同源重组连接至由Cla I和Sal I双酶切后的pPcdna1线性化质粒上,构建得到Pcdna1-tgaza5质粒即为所述的以hph为筛选标记,Pcdna1为强启动子过量表达tgaza5的重组质粒。
3.一种基因工程菌株,其特征在于将权利要求1或2所述的重组质粒转化保藏号为CGMCC No.3308的SQR-T037野生型菌株所得。
4.权利要求1或2所述的重组表达质粒在制备所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物中的应用。
5.权利要求3所述的基因工程菌株在制备所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物中的应用。
6.权利要求3所述的基因工程菌株制备的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物。
7.权利要求6所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物在制备抗氧化剂中的应用,其特征在于所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物包含T22azaphilone。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物包含以下化合物:
9.T22azaphilone在制备抗氧化剂中的应用。
10.编码权利要求6所述的木霉菌Azaphilones类次级代谢产物的基因簇在通过基因工程手段制备抗氧化剂中的应用。
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