[发明专利]一种产虫草素基因工程菌及其应用在审
| 申请号： | 202010808145.X | 申请日： | 2020-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN114075515A | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 范爱丽 | 申请（专利权）人： | 北京化工大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/67;C12N15/65;C12P19/40;C12R1/66 |
| 代理公司： | 北京睿邦知识产权代理事务所(普通合伙) 11481 | 代理人： | 方莉 |
| 地址： | 100029 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 虫草 基因工程 及其 应用 | ||
1.一种产虫草素的基因工程菌，其为含有质粒pQF1的重组构巢曲霉菌。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述质粒pQF1携带有pyr4序列、URA3序列、Amp抗性基因序列和AMA1序列中的一种或几种。
3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述AMA1序列包括内源性AMA1序列，以及外源性AMA1序列；优选地，所述外源性AMA1序列来源于构巢曲霉菌GO51株；进一步优选地，所述构巢曲霉菌G051的保藏编号为ATCC 38163；更进一步优选地，所述外源性AMA1序列如SEQ No.1所示。
4.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述pyr4序列来源于粗糙脉孢菌OR74A株；优选地，所述粗糙脉孢菌OR74A株的保藏编号为MYA-4619D-2；进一步优选地，所述pyr4序列如SEQ No.2所示。
5.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述URA3序列来源于酵母菌S288C株；优选地，所述酵母菌S288C菌株的保藏编号为ATCC 20450，进一步优选地，所述URA3序列如SEQ No.3所示。
6.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，Amp抗性基因序列来源于枯草芽孢杆菌2014-3557株质粒pGMrib，或者质粒PUC18，PBR322；优选地，所述Amp抗性基因序列如SEQ No.4所示。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的基因工程菌，其特征在于，用于构建重组构巢曲霉菌的模式菌为原始构巢曲霉菌或改造后的构巢曲霉菌；优选地，用于构建重组构巢曲霉菌的模式菌包括构巢曲霉菌A1145株和/或构巢曲霉菌LO8030株。
8.根据权利要求1-7中任意一项所述的产虫草素基因工程菌的在生产虫草素中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用包括将所述基因工程菌接入发酵培养基，进行发酵培养，然后对所获得的发酵培养液进行分离纯化，制得虫草素。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述发酵培养基包括CD-ST培养基；优选地，所述发酵的温度为20-40℃，优选为25-28℃；和/或，所述发酵的时间为5-12天，优选为10-12天。
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