[发明专利]四种血液来源蛋白的纯化方法有效
| 申请号： | 202010811276.3 | 申请日： | 2020-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN112409476B | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 易维京;朱攀;任燕斌;赵威;赵忠颢 | 申请（专利权）人： | 中元汇吉生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C07K14/79;C07K14/47;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400037 重庆市大渡口区*** | 国省代码： | 重庆;50 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 血液 来源 蛋白 纯化 方法 | ||
1.四种血液来源蛋白的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、将血清透析到pH为4.2到4.8的层析缓冲液中，得透析样品，用阴离子交换层析对所述样品进行纯化，收集流穿液I和洗脱液I；
b、将洗脱液I上样到HP亲和层析柱中进行纯化，收集先流出的流穿液II，流穿液II含有AAG蛋白；加入甘氨酸缓冲液，洗脱亲和层析填料中附着的HP，收集HP；
c、流穿液II透析到pH为3.0-3.8的层析缓冲液中，再用阴离子交换层析进行纯化，收集AAG蛋白；
d、调流穿液I的pH至5.0-5.8，用阳离子交换层析进行纯化，收集流穿液III与洗脱液II；
e、将流穿液III添加到AAT亲和层析柱中，去除掉先流出的流穿液之后，进行洗脱，得提纯的AAT蛋白，所述洗脱步骤所用试剂包括Tris和MgCl2；
f、将洗脱液II透析到pH为5.3-5.8的层析缓冲液中，再用阴离子交换层析进行纯化，得TRF蛋白；
其中，
所述阴/阳离子交换层析和亲和层析，均包含平衡、上样、流穿和洗脱四个过程；
所述层析缓冲液选自醋酸钠缓冲液、磷酸缓冲液、盐酸缓冲液或碳酸缓冲液；
所述平衡的过程中，所述阴/阳离子交换层析所用试剂为层析缓冲液，所述亲和层析所用试剂为平衡缓冲液；
所述阴离子交换层析的填料为弱阴离子交换层析填料DEAE；
所述阳离子交换层析的填料为强阳离子交换层析填料SP。
2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述平衡缓冲液选自PBS、PB或Tris缓冲液。
3.如权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，所述洗脱的过程中，步骤a、c、d、f中需用到洗脱试剂A，所述洗脱试剂A包括：醋酸钠缓冲液和NaCl。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中元汇吉生物技术股份有限公司，未经中元汇吉生物技术股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010811276.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：电驱动车辆的冷却装置
- 下一篇：用于执行安全命令的存储器装置及方法
