[发明专利]夹载角鲨化合物的磷脂包被铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统及SARS-CoV2亚单位疫苗有效
申请号: | 202010814061.7 | 申请日: | 2020-08-13 |
公开(公告)号: | CN111939253B | 公开(公告)日: | 2021-04-27 |
发明(设计)人: | 王理想;许小锋;白宗胜;王旭之;陈贤碧 | 申请(专利权)人: | 合肥诺为尔基因科技服务有限公司 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K39/215;A61K39/385;A61P31/14 |
代理公司: | 北京知联天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11594 | 代理人: | 张陆军 |
地址: | 230088 安徽省合*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 夹载角鲨 化合物 磷脂 包被 纳米 疫苗 佐剂 传递 系统 sars cov2 单位 | ||
1.一种基于夹载角鲨化合物的磷脂包被铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的SARS-CoV2亚单位疫苗,其特征在于:采用以下步骤制得 :
取脂质材料及Squalene,置于梨形烧瓶,其中所述脂质材料指SPC和DOTAP,SPC/DOTAP/Squalene 质量比 10:10:1;加入所述脂质材料3倍重量的氯仿溶解,室温,以90 rpm旋转蒸发除尽有机溶剂,形成SPC/DOTAP/Squalene薄膜;
按照AN/所述脂质材料的质量比 10:1,向上述烧瓶加入含有1% w/v,平均粒径80纳米的氢氧化铝纳米粒的10 mM的HEPES缓冲液溶液, pH=7,以120 rpm旋转1小时以充分水化SPC/DOTAP/Squalene薄膜形成SPLAN;
随后将烧瓶转置于恒温电磁搅拌器,加入电磁搅拌子,在室温、200 rpm搅拌条件下,按照AN/SCV2-RBD 质量比10:1,缓慢滴加0.1%(w/v)的SCV2-RBD抗原的10 mM HEPES缓冲液溶液,pH为7,滴加完毕,继续搅拌30分钟,即形成SCV2-RBD-SPLAN;
所述SCV2-RBD抗原的氨基酸序列如Seq ID No.1所示。
2. 一种基于夹载角鲨化合物的磷脂包被铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统的SARS-CoV2亚单位疫苗,其特征在于,采用以下步骤制得 :
取脂质材料及Squalene,置于梨形烧瓶,其中所述脂质材料指SPC和DOTAP,SPC/DOTAP/Squalene 质量比15:10:1;加入所述脂质材料3倍重量的氯仿溶解,室温,以90 rpm旋转蒸发除尽有机溶剂,形成SPC/DOTAP/Squalene薄膜;
按照AN/所述脂质材料的质量比8:1,向上述烧瓶加入含有1% w/v,平均粒径50纳米的氢氧化铝纳米粒的10 mM HEPES缓冲液溶液, pH为7,以120 rpm旋转1小时以充分水化SPC/DOTAP/Squalene薄膜形成SPLAN;
随后将烧瓶转置于恒温电磁搅拌器,加入电磁搅拌子,在室温、200 rpm搅拌条件下,按照AN/SCV2-RBD 质量比20:1,缓慢滴加0.1%(w/v)的SCV2-RBD抗原的10 mM HEPES缓冲液溶液,pH=7,滴加完毕,继续搅拌30分钟,即形成SCV2-RBD-SPLAN;
所述SCV2-RBD抗原的氨基酸序列如Seq ID No.1所示。
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