[发明专利]一种发酵茶的检测方法

权利要求书

1.一种发酵茶的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取发酵茶供试品进行检测，该检测的色谱条件包括：

色谱柱：规格为粒径5μm、250mm×4.6mm的反相色谱柱；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱条件：0～6min，流动相A从60％降至40％，6～22min，流动相A从40％降至5％，22～22.1min，流动相A从5％升至60％，22.1～30min，流动相A保持60％。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱条件还包括：柱温30～40℃，流速0.8～1.0mL/min。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，柱温为35℃；流动相的流速为1mL/min；荧光检测器激发波长为333nm，发射波长为460nm。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括对对照品溶液进行检测，该检测的色谱条件包括：

色谱柱：规格为粒径5μm、250mm×4.6mm的反相色谱柱；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱条件：0～6min，流动相A从60％降至40％，6～22min，流动相A从40％降至5％，22～22.1min，流动相A从5％升至60％，22.1～30min，流动相A保持60％；所述对照品包括赭曲霉毒素A和赭曲霉毒素B中的一种或多种。

5.根据权利要求1-4任一所述的检测方法，其特征在于，所述发酵茶供试品制备方法包括：

取发酵茶样品加入提取剂提取，提取物经过净化柱处理后得所述发酵茶供试品。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述净化柱选自赭曲霉毒素免疫亲和柱。

7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述提取剂选自乙酸乙酯。

8.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述发酵茶供试品制备方法包括：

提取：取发酵茶样品磨碎，加入提取剂浸泡，涡旋，离心，取上清液，上清液用旋转蒸发仪蒸干；

净化富集：用复溶剂Ⅰ复溶，用水稀释，将稀释液过赭曲霉毒素免疫亲和柱净化，依次用真菌毒素清洗缓冲液、水淋洗免疫亲和柱，然后用洗脱液洗脱，洗脱液用旋转蒸发仪蒸干后加入复溶剂Ⅱ，过滤。

9.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述发酵茶供试品制备方法包括：

提取：取发酵茶样品，用乙酸乙酯浸泡10分钟，涡旋5分钟，12000转/分钟离心10分钟，取上清液于40℃下旋蒸至干；

净化富集：用80％甲醇水溶液复溶，用水稀释；将上述稀释液过赭曲霉毒素免疫亲和柱净化，流速为1滴/秒；依次用真菌毒素清洗缓冲液、淋洗免疫亲和柱，淋洗时的流速约为1滴/秒；之后再用2％乙酸甲醇溶液洗脱，于40℃下旋蒸至干，用0.1％甲酸水-乙腈溶液(6:4，v/v)复溶后，过0.45μm有机膜。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述真菌毒素清洗缓冲液为PBS缓冲液。