[发明专利]一种发酵茶的检测方法

说明书

本发明涉及一种发酵茶的检测方法，包括如下步骤：取发酵茶供试品进行检测，该检测的色谱条件包括：色谱柱：反相色谱柱(粒径5μm，250mm×4.6mm)；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱条件：0～6min，流动相A从60％降至40％，6～22min，流动相A从40％降至5％，22～22.1min，流动相A从5％升至60％，22.1～30min，流动相A保持60％。本发明通过筛选得到了一种发酵茶的检测方法，用该方法能对多种赭曲霉毒素进行检测，可应用于茶叶发酵过程中的质量控制和风险监控，确保发酵茶产品的安全性。

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，具体涉及一种发酵茶的检测方法。

背景技术

赭曲霉毒素是赭曲霉、纯绿青霉、炭黑曲霉等真菌产生的一组结构类似的有毒代谢产物，广泛存在于食品、饲料及农产品中。赭曲霉素包含7种类似化学结构的化合物，常见的有赭曲霉毒素A(ochratoxin A， OTA)、赭曲霉毒素B(ochratoxin B，OTB)等，其中赭曲霉毒素B是赭曲霉毒素A的脱氯衍生物。

赭曲霉毒素A在自然界中分布最广泛，毒性最强，对人类影响最大。赭曲霉毒素B绝对数量和毒性相对较低，但生物积累依旧不容忽视。毒理学研究表明，赭曲霉毒素具有肾毒性、肝毒性、免疫毒性、遗传毒性以及致畸和致突变作用等多种毒性，对人体健康有很大的潜在危害。因此世界各国非常重视赭曲霉毒素对人体的危害，均制定了相关限量标准，确保食品安全和消除国际贸易技术壁垒。

发酵茶是茶叶经发酵加工这一工序的茶的总称，属于一类发酵食品。发酵茶在发酵过程及最终产品会涉及曲霉属、青霉属等多种真菌菌种，可能受赭曲霉毒素污染。茶叶基质复杂，干扰严重，目前茶叶中赭曲霉毒素检测方法研究，仅赭曲霉毒素A取得进展。

随着人们对健康产品的需求，发酵茶市场日益扩大，对发酵茶安全要求也不断提高。因此，急需建立一种高灵敏度、特异性好的发酵茶的检测方法，从而有效监控发酵茶中赭曲霉毒素安全风险。

发明内容

本发明解决的技术问题为提供一种适用于发酵茶检测赭曲霉毒素的方法。

本发明的目的可通过下列技术方案来实现：

一种发酵茶的检测方法，包括如下步骤：取发酵茶供试品进行检测，该检测的色谱条件包括：

色谱柱：反相色谱柱(粒径5μm，250mm×4.6mm)；流动相A为 0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱条件：0～6min，流动相 A从60％降至40％，6～22min，流动相A从40％降至5％，22～22.1min，流动相A从5％升至60％，22.1～30min，流动相A保持60％。

进一步地，所述色谱条件还包括：柱温30～40℃，流速0.8～1.0 mL/min。

进一步地，柱温为35℃；流动相的流速为1mL/min；荧光检测器激发波长为333nm，发射波长为460nm。

进一步地，所述检测方法还包括对对照品溶液进行检测，该检测的色谱条件包括：

色谱柱：Agilent TC-C18反相色谱柱(粒径5μm，250mm×4.6mm)；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱条件：0～6min，流动相A从60％降至40％，6～22min，流动相A从40％降至5％， 22～22.1min，流动相A从5％升至60％，22.1～30min，流动相A保持60％。

所述对照品包括赭曲霉毒素A和赭曲霉毒素B中的一种或多种。

根据检测结果，可建立赭曲霉毒素A和/或赭曲霉毒素B标准曲线。用液相色谱仪荧光检测器检测样品溶液，计算样品中赭曲霉毒素A和/ 或赭曲霉毒素B的含量。所述液相色谱可采用Waters e2695 HPLC (Waters FLR 2475)高效液相色谱仪。