[发明专利]转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测试剂，该检测试剂包括引物对和探针，引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；探针的序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测试剂盒，其中包括权利要求1所述的检测试剂。

3.权利要求1所述的定量PCR检测试剂在转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测中的应用。

4.权利要求3所述的定量PCR检测试剂盒在转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测中的应用。

5.一种转基因抗虫玉米GAB-3转化体的定量PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测样品的基因组DNA作为模板；

(2)加入权利要求1所述的检测试剂的PCR反应液进行荧光PCR反应；

(3)反应结束后，根据扩增曲线判断样品是否为转基因抗虫玉米GAB-3：如果扩增曲线有典型荧光扩增曲线，则说明样品为转基因抗虫玉米GAB-3；如果扩增曲线无典型荧光扩增曲线，则说明样品不是转基因抗虫玉米GAB-3。

6.权利要求5所述的定量PCR检测方法，其特征在于，所述的步骤(2)的PCR反应体系以25μL反应体积为例表示如下：

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“-”表示体积不确定，如果PCR 缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液，根据 TaqDNA 聚合酶的浓度确定其体积，并相应调整 ddH₂O 的体积，使反应体系总体积达到25.0μL；

若采用定量 PCR 试剂盒，则按试剂盒的推荐用量配制反应体系，但上/下游引物及探针的用量按本表执行。

7.权利要求6所述的定量PCR检测方法，其特征在于，所述的步骤(2)的PCR反应程序为：95℃变性5min；95℃变性15s，60℃退火延伸60s，共进行40次循环；在第二阶段的60℃退火延伸时段收集荧光信号。