[发明专利]一种用于再生虎克姜花植株的系列培养试剂盒及其应用有效
申请号: | 202010828922.7 | 申请日: | 2020-08-18 |
公开(公告)号: | CN111937746B | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
发明(设计)人: | 李永泉;胡秀;张媚;谭嘉川 | 申请(专利权)人: | 仲恺农业工程学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 颜希文 |
地址: | 510225 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 再生 虎克姜花 植株 系列 培养 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种建立再生虎克姜花植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)选取饱满、无损伤、未开裂的果实作为外植体;
(2)在无菌条件下,对选取的果实进行消毒,无菌水冲洗后用无菌操作接种种子到种子萌发培养基,得到无菌苗;所述种子萌发培养基包括MS培养基、蔗糖和琼脂,所述种子萌发培养基中,蔗糖的浓度为28~30g/L,琼脂的浓度为7.0~8.0g/L;
(3)当步骤(2)获得的无菌苗龄为7天以上时,将无菌苗的下胚轴切为0.3~0.5cm长的1~2段,接种到愈伤组织诱导培养基,培养30天以上,得到愈伤组织;所述愈伤组织诱导培养基包括MS培养基、激动素、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖和琼脂,所述愈伤组织诱导培养基中,激动素的浓度为0.1~0.5mg/L,2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0.5~1.0mg/L,蔗糖的浓度为28~30g/L,琼脂的浓度为7.0~8.0g/L;
(4)将步骤(3)得到的愈伤组织分成块接种到愈伤组织增殖培养基上,以月为培养周期,继代3次,得到初始接种量60倍以上的愈伤组织;所述愈伤组织增殖培养基包括MS培养基、激动素、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖和琼脂,所述愈伤组织增殖培养基中,激动素的浓度为0.1~0.2 mg/L,2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0.3~0.5 mg/L,蔗糖的浓度为28~30g/L,琼脂的浓度为7.0~8.0g/L;
(5)将步骤(4)得到的愈伤组织切块接种到愈伤组织再分化培养基上,培养得到无菌苗;所述愈伤组织再分化培养基包括MS培养基、6-苄氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖和琼脂,所述愈伤组织再分化培养基中,6-苄氨基嘌呤的浓度为1.0~2.0mg/L,吲哚-3-乙酸的浓度为0.1~2.0mg/L,蔗糖的浓度为28~30g/L,琼脂的浓度为7.0~8.0g/L;
(6)将步骤(5)得到的无菌苗放置在有散射光的地方炼苗3~4天,清洗后移栽到珍珠岩和泥炭土等比混合基质中,观察成活率。
2.根据权利要求1所述的建立再生虎克姜花植株的方法,其特征在于,所述步骤(2)的培养条件为黑暗培养,温度为24~26℃。
3.根据权利要求1所述的建立再生虎克姜花植株的方法,其特征在于,所述步骤(3)~(6)的培养条件为温度24~26℃、光照12h/d、光照强度2500lx。
4.根据权利要求1~3任一项所述的方法在建立再生虎克姜花植株中的应用。
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