[发明专利]磁性纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒检测试剂盒

说明书

本发明属于生物医药领域，涉及磁性纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒检测试剂盒。所述的检测试剂盒含有使用磁性纳米颗粒标记的免疫层析法检测新型冠状病毒的试剂；所述的检测新型冠状病毒的试剂包括：免疫磁珠，所述的免疫磁珠是偶联抗体的磁珠，所述的抗体是人IgM或者IgG的抗体；识别抗新型冠状病毒抗体的物质。本发明还提供了磁性纳米颗粒标记的免疫层析法检测新冠病毒抗体的方法及相关的试剂、试剂盒。结果显示，本发明的试纸条的检测准确率90%以上，最快5分钟内就可以判断结果。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及磁性纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒检测试剂盒。

背景技术

新型冠状病毒病(COVID-19) 的暴发和在全球迅速蔓延。虽然病毒(SARS-CoV-2)核酸RT-PCR检测已成为诊断SARS-CoV-2感染的标准方法，但这些实时PCR检测试剂盒有很多局限性，假阴性率过高，迫切需要一种准确、快速的检测方法，快速发现大量感染患者和无症状携带者，防止病毒传播，确保患者得到及时治疗。

目前从分子层面上诊断SARS-COV-2包括有核酸的检测方法和抗原/抗体的免疫检测方法，基于核酸的检测方法包括病毒核酸特异基因检测和病毒基因组测序。目前已批准在临床上使用的核酸检测试剂盒，存在操作繁琐、耗时长、需要集中送检和专业设备和人员等限制，有很高的技术门槛，大大的限制了核酸检测方法的使用和便捷性，同时目前临床上发现假阴性率偏高。

发明内容

本发明目的在于：提供一种磁性纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒检测试剂盒，以便准确、快速的检测、快速发现新冠病毒的抗体。

本发明的再一目的在于：提供上述试剂盒的制备方法。

本发明的又一目的在于：提供一种使用上述试剂盒中含有的磁性纳米颗粒和试剂制备的试纸。

为了达到上述目的，本发明研究了可以使用的检测手段。除了检测病毒的核酸外，还有病毒病原检测法和抗体检测法。抗体检测方法主要是针对抗体IgG和IgM快速诊断试剂盒（胶体金法），以新型冠状病毒的S蛋白作为包被抗原和标记抗原，利用双抗原夹心原理，检测临床样本中针对病毒核蛋白的特异性抗体，该方法可以在15分钟内定性检测结果，同时无需复杂设备，适合初级医院的初筛，该方法适合定性筛查，可以在短期内大规模的筛查人群。基于病毒抗原的检测是制备特异性抗体，检测样本中特异性的病毒抗原，该方法既可以开发成应用于一线的快速定性检测方法，也可以开发成定量检测的检测方法。

磁性纳米颗粒是一种处于纳米级（1-100nm）的磁性材料，其所具有的表面效应、量子效应、小尺寸效应和宏观量子隧道效应等特性赋予了他们独特的光学、磁学、电学、热学、力学及化学活性。Fe₃O₄纳米磁珠具有独特的光、磁、电、热性能，可用于产生不同类型的检测信号、放大检测信号的强度及简化检测过程等，因此基于纳米材料的体外诊断技术具有广阔的应用前景。目前存在几种常见的磁性纳米颗粒，如氧化钴、氧化镍和氧化铁等。其中，氧化铁纳米颗粒由于其良好的生物相容性、生物可降解性和超顺磁性等，在生物医学领域得到了广泛的研究。本发明在上述研究基础上完成。

本发明目的通过下述方案实现：一种磁性纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新型冠状病毒检测试剂盒，含有使用磁性纳米颗粒标记的免疫层析法检测新型冠状病毒的试剂，其中，包括：

免疫磁珠，所述的免疫磁珠是偶联抗体的磁珠，所述的抗体是人IgM或者IgG的抗体；

识别抗新型冠状病毒抗体的物质。

较好的，所述的免疫磁珠是Fe₃O₄纳米磁珠。