[发明专利]一种产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其固体发酵生产γ-聚谷氨酸的方法在审
申请号: | 202010836148.4 | 申请日: | 2020-08-19 |
公开(公告)号: | CN114075520A | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
发明(设计)人: | 闫巧娟;刘宏;江正强;骆珅;杨绍青 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/02;C12R1/07 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 张立娜 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 谷氨酸 贝莱斯 芽孢 杆菌 及其 固体 发酵 生产 方法 | ||
1.贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263,其在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.20318。
2.一种菌剂,其活性成分为权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263。
3.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263或权利要求2所述的菌剂在生产γ-聚谷氨酸中的应用。
4.一种生产γ-聚谷氨酸的方法,包括如下步骤:对权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263进行固体发酵培养,从发酵产物中获得γ-聚谷氨酸。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:对所述贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)CAU263进行所述固体发酵培养时,采用的固体发酵培养基由固体基质和外源添加物组成,所述固体基质为工农业副产物,所述外源添加物由碳源、谷氨酸钠、K2HPO4和水组成。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:在所述固体发酵培养基中,所述工农业副产物、所述碳源、谷氨酸钠、K2HPO4和水的配比为1kg:50~200g:50~200g:0.01~0.5g:2~4L。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:所述工农业副产物为瓜尔豆粕、黄豆粕、棉籽粕、小麦麸皮、面包渣、啤酒糟、豆饼粉、芝麻饼粉中的任意一种或几种的混合物;和/或
所述碳源为葡萄糖、甘油、蔗糖、可溶性淀粉中的任意一种或几种的混合物;和/或
组成所述固体发酵培养基中的所述工农业副产物需要经过包括如下步骤的预处理:粉碎过20目筛后,按1g所述工农业副产物:0.5~2mL水的比例加入水浸润12~24h。
8.根据权利要求5-7中任一所述的方法,其特征在于:对所述贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263进行所述固体发酵培养时,培养温度为30~37℃恒温,和/或培养湿度保持在50~70%,和/或培养时间48~96h,和/或每隔12~24h翻转培养物一次。
9.根据权利要求5-8中任一所述的方法,其特征在于:从所述发酵产物中获得所述γ-聚谷氨酸是按照包括如下步骤的方法进行的:将所述发酵产物60℃以下低温烘干至恒重,粉碎后过20目筛,取3~5g粉末,加水提取1~2h,所述粉末和水的比例为1g所述粉末加入10mL水,离心,上清液中加入1~4倍体积甲醇,静置12~24h,离心,收集沉淀,用1~4倍体积甲醇洗涤,真空冷冻干燥,即得γ-聚谷氨酸。
10.根据权利要求5-9中任一所述的应用或方法,其特征在于:所述固体发酵培养基由瓜尔豆粕、蔗糖、谷氨酸钠、K2HPO4和水组成;在所述固体发酵培养基中,瓜尔豆粕、蔗糖、谷氨酸钠、K2HPO4和水的配比为1kg:100g:150g:0.05g:3L;
和/或
对所述贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CAU263进行所述固体发酵培养时,培养温度为37℃恒温,和/或培养湿度保持在70%,和/或培养时间48h,和/或每隔12h翻转培养物一次;和/或
所述γ-聚谷氨酸的分子量为1000kDa以上;
进一步地,所述γ-聚谷氨酸的分子量为4020kDa。
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