[发明专利]用于鉴定短乳杆菌的恒温检测方法及其专用引物与试剂盒有效
| 申请号： | 202010842157.4 | 申请日： | 2020-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN111849966B | 公开（公告）日： | 2022-06-21 |
| 发明（设计）人： | 郭立芸;刘秀;谢鑫;梁玉林;徐文文;丁梦璇;周鹏飞;宋玉梅;尹建军;贾凤超;宋全厚 | 申请（专利权）人： | 北京燕京啤酒股份有限公司;中国食品发酵工业研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 何叶喧 |
| 地址： | 101300*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴定 杆菌 恒温 检测 方法 及其 专用 引物 试剂盒 | ||
1.特异引物组，由引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB组成；
所述引物F3为序列表的序列2所示的单链DNA分子；
所述引物B3为序列表的序列3所示的单链DNA分子；
所述引物FIP为序列表的序列4所示的单链DNA分子；
所述引物BIP为序列表的序列5所示的单链DNA分子；
所述引物LF为序列表的序列6所示的单链DNA分子；
所述引物LB为序列表的序列7所示的单链DNA分子。
2.权利要求1所述特异引物组在制备试剂或试剂盒中的应用；所述试剂或试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)鉴定或辅助鉴定短乳杆菌；(b2)检测待测样本中是否含有短乳杆菌。
3.特异试剂，包括如下组分：权利要求1所述特异引物组；所述特异试剂为液态，每11μL检测试剂中，各引物含量为：引物F3 2.5pmol、引物B3 2.5pmol、引物FIP 20pmol、引物BIP20pmol、引物LF 10pmol、引物LB 10pmol。
4.含有权利要求1所述特异引物组或权利要求3所述特异试剂的试剂盒；所述试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)：(b1)鉴定或辅助鉴定短乳杆菌；(b2)检测待测样本中是否含有短乳杆菌。
5.一种鉴定或辅助鉴定短乳杆菌的方法，包括如下步骤：
(1)提取待测微生物的基因组DNA；
(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述特异引物组进行环介导等温扩增；如果权利要求1所述特异引物组可以实现以所述基因组DNA为模板的特异性扩增，待测微生物为或候选为短乳杆菌；如果权利要求1所述特异引物组不能实现以所述基因组DNA为模板的特异性扩增，待测微生物为或候选为非短乳杆菌。
6.一种检测待测样本中是否含有短乳杆菌的方法，包括如下步骤：
(1)提取待测样本的总DNA；
(2)以步骤(1)提取的总DNA为模板，采用权利要求1所述特异引物组进行环介导等温扩增；如果权利要求1所述引物组可以实现以所述总DNA为模板的特异性扩增，所述待测样本含有或疑似含有短乳杆菌；如果权利要求1所述特异引物组不能实现以所述总DNA为模板的特异性扩增，所述待测样本不含有或疑似不含有短乳杆菌。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述待测样本为啤酒样本。
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