[发明专利]一种D-二聚体检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开一种D‑二聚体检测试剂盒，涉及医学免疫体外诊断技术领域，本发明包括R1和R2试剂；R1试剂为：30‑150mm/L磷酸盐缓冲液、0.5‑2g/L聚乙二醇‑10000、0.8‑0.9g/L氯化钠、0.1g/L叠氮钠，溶剂为纯化水；R2试剂为：0.5‑2mg/mL鼠抗人D‑二聚体单克隆抗体胶乳、10‑50mmol/L 4‑羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、0.9‑8g/L氯化钠、1‑5g/L牛血清白蛋白、0.1‑0.3g/L吐温20、0.1g/L叠氮钠，溶剂为纯化水。本发明还提供上述试剂盒的制备方法。本发明的有益效果在于：本发明中的试剂盒与现有技术中的试剂盒相比，试剂盒的稳定性明显增加。

技术领域

本发明涉及医学免疫体外诊断技术领域，具体涉及一种D-二聚体检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

纤维蛋白溶解系统是人体最重要的抗凝系统，它对保持血管壁的正常通透性，维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用。血液中含有纤维蛋白，当纤维蛋白凝结块形成时，在纤溶酶原激活剂的作用下，纤溶酶原转化为纤溶酶，纤溶酶降解纤维蛋白和交联纤维蛋白形成各种可溶片段。其中，D-二聚体是交联纤维蛋白特异的降解产物，是最小的降解产物。

在正常生理状态下，人体内的凝血与纤溶系统保持着动态平衡。当平衡被破坏时，血管内凝血倾向增强，纤维蛋白聚集形成凝结块，纤维蛋白降解产物增加，D-二聚体含量增加。因此D-二聚体的生成或增高反映了凝血与纤溶系统的双重激活，可作为体内高凝状态和纤溶亢进的分子标志物之一，也是目前鉴别原发性和继发性纤溶以及监测溶栓治疗等方面颇有价值的重要指标。因此，D-二聚体的检测对血栓形成性疾病如：弥散性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓形成(DVT)、肺栓塞(PE)、脑血管疾病、心肌梗死、重症肝炎等均有重要的诊断价值及临床意义。

目前，D-二聚体的检测方法主要有：乳胶凝集法、酶联免疫吸附(ELISA)法、荧光抗体检测法、胶体金免疫渗透试验(GIA)和乳胶免疫比浊法等。其中，乳胶凝集法操作简便、用时短，但主要依靠肉眼来观察检测的结果，对检测结果的判断具有一定的主观性，只能用于定性或半定量测定，临床上应用范围较小；ELISA法具有定量、高敏感性等优点，但此方法操作复杂，用时较长，不适用于单标本检测；荧光抗体检测法与ELISA法具有一致性，在单个标本的临床检测中极为适用，但是检测时需要昂贵的仪器，在临床使用具有较大限制性；胶体金免疫渗透法具有操作简便、检测用时短、灵敏度高等优点，但此检测方法受类风湿因子、胆红素等干扰影响；乳胶免疫比浊法具有操作简便、快速、定量准确及敏感度高等优点，可满足门急诊等需要，在临床研究中应用越来越广泛。

公开号为CN106093419A的专利申请公开一种测定D-二聚体的试剂盒及其制备方法，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，但是该试剂盒的稳定性较差，限制了D-二聚体试剂盒的应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于现有的D-二聚体的试剂盒稳定性较差，限制了D-二聚体试剂盒的应用。

本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：

本发明提供一种D-二聚体检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂；

所述R1试剂主要由以下浓度的原料制成：30-150mm/L磷酸盐缓冲液、0.5-2g/L聚乙二醇-10000、0.8-0.9g/L氯化钠、0.1g/L叠氮钠，溶剂为纯化水；

所述R2试剂主要由以下浓度的原料制成：0.5-2mg/mL鼠抗人D-二聚体单克隆抗体胶乳、10-50mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、0.9-8g/L氯化钠、1-5g/L牛血清白蛋白、0.1-0.3g/L吐温20、0.1g/L叠氮钠，溶剂为纯化水。

有益效果：本发明中的D-二聚体的试剂盒与公开号为CN106093419A的专利申请中公开的D-二聚体的试剂盒相比，试剂盒的稳定性明显增加。