[发明专利]用于检测猫泛白细胞减少症病毒的引物和探针及检测试剂盒在审
| 申请号： | 202010844841.6 | 申请日： | 2020-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN111961756A | 公开（公告）日： | 2020-11-20 |
| 发明（设计）人： | 梁瑞英;梁琳;崔尚金;翟志安;赵静杰 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 黄爽 |
| 地址： | 100091 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 泛白 细胞 减少 病毒 引物 探针 试剂盒 | ||
1.猫泛白细胞减少症病毒检测引物，其特征在于，包括序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO:2所示的反向引物。
2.与权利要求1所述引物配套使用的探针，其特征在于，探针序列如SEQ ID NO:3所示，探针序列的5′端具有荧光基团，3′端具有淬灭基团。
3.含有权利要求1所述引物和/或权利要求2所述探针的检测试剂或试剂盒。
4.猫泛白细胞减少症病毒检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物和权利要求2所述探针。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、DNA聚合酶、可溶性镁盐、PCR反应缓冲液、阳性标准质粒中的至少一种。
6.用于检测猫泛白细胞减少症病毒的qPCR反应体系，其特征在于，所述反应体系按20μL计包含：2×AceQ qPCR Probe Master Mix 10μl，DNA模板1μl，10μM正向引物和反向引物各1μl，10μM探针0.4μl，ddH2O补齐至20μl；
其中，正向引物、反向引物和探针的序列分别如SEQ ID NO:1-3所示。
7.非诊断目的猫泛白细胞减少症病毒检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取待测样品中的DNA；
(2)以DNA为模板，利用SEQ ID NO:1-3所示的引物和探针进行PCR扩增；
(3)分析PCR扩增产物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(2)的PCR反应体系为：2×AceQ qPCRProbe Master Mix 10μl，DNA模板1μl，10μM正向引物和反向引物各0.2～1μl，10μM探针0.4～0.6μl，ddH2O补齐至总体积20μl。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(2)的PCR扩增条件为：93～95℃预变性3～5min；93～95℃变性10～15s，55～65℃退火及延伸30～45s，35～40个循环。
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