[发明专利]一种可同时检测艾滋病毒1、2型病毒以及人类T淋巴细胞白血病病毒1、2型的检测方法在审
申请号: | 202010846256.X | 申请日: | 2020-08-21 |
公开(公告)号: | CN111926118A | 公开(公告)日: | 2020-11-13 |
发明(设计)人: | 李育修 | 申请(专利权)人: | 苏州育德扬生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 王熙文 |
地址: | 215000 江苏省苏州市相*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 艾滋病毒 病毒 以及 人类 淋巴细胞 白血病病毒 方法 | ||
1.一种可同时检测艾滋病毒1、2型病毒以及人类T淋巴细胞白血病病毒1、2型的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)首先从网络的基因数据库中,分别取得艾滋病毒1、2型病毒、人类T淋巴细胞白血病1、2型的基因序列;
(2)根据上述的基因序列设计各型病毒的引物和探针;
(3)使用RNA提取试剂将各型病毒的RNA提取后,将提取的各型病毒的RNA反转录为互补DNA模板;加入上述设计的各型病毒的引物和探针,进行聚合酶连锁反应放大增幅;
(4)根据各型病毒探针上所带的荧光物质的不同,如果检测结果为阳性,则检测人员根据聚合酶连锁反应所产生的荧光波长判断所检测到的病毒是四种病毒中的哪一种。
2.根据权利要求1所述的一种可同时检测艾滋病毒1、2型病毒以及人类T淋巴细胞白血病病毒1、2型的检测方法,其特征在于:步骤(2)中,所述各型病毒的引物和探针序列分别为:
HIV-1:
上游引物:5'-AGT RGG GGGACAYCARGC AGCHATGCARAT-3';
下游引物:5'-TAC TAG TAG TTC CTG CTATRT CAC TTC C-3';
探针:5'-FAM-ATC AAT GAR GAR GCT GCA GAA TGG GA-BHQ1-3';
HIV-2:
上游引物:5'-TAG TCG CCG CCT GGT CA-3';
下游引物:5'-TTC CTG CCG CCC TTACT-3';
探针:5'-HEX-ACC CTG GTC TGT TAG-BHQ1-3';
HTLV-1:
上游引物:5'-CCG CCAATCACT CATACAAC C-3';
下游引物:5'-AGC TGG TAGAGG TACATG CAGAC-3';
探针:5'-NED-CCACCC TTG GGCAGCACC TCC-BHQ2-3';
HTLV-2:
上游引物:5'-TATACAAAATGT TCC TACACA CAG-3';
下游引物:5'-GAT GGA GTGATAGGG GAGAAG-3';
探针:5'-Cy5-CCACCC TTG GGCAGCACC TCC-BHQ3-3'。
3.根据权利要求1所述的一种可同时检测艾滋病毒1、2型病毒以及人类T淋巴细胞白血病病毒1、2型的检测方法,其特征在于:步骤(3)中,所述聚合酶连锁反应的条件为:95℃,20秒;然后95℃,15秒、62℃,30秒进行40个循环;最后以4℃停止反应。
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