[发明专利]使用珠分离高分子量DNA在审
申请号: | 202010846453.1 | 申请日: | 2020-08-21 |
公开(公告)号: | CN112410166A | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
发明(设计)人: | P·A·科特西尔;B·W·塔伦;E·J·坎托 | 申请(专利权)人: | 新英格兰生物实验室公司 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12N15/10 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 张全信 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 使用 分离 分子量 dna | ||
1.一种试剂盒,其包括:
(a)一个或多个最小尺寸为至少200μm的珠;和
(b)珠保持管,其具有用于接收DNA溶液的开口和一个或多个出口开口,其中每个出口开口的大小小于所述一个或多个珠的最小尺寸,并且其中所述珠保持管包括:
(i)至少一个脊,用于将所述一个或多个珠支撑在所述一个或多个出口开口上方,以使所述一个或多个出口开口不被所述一个或多个珠阻塞;或
(ii)以网格排列的一系列出口开口。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述一个或多个珠的最小尺寸为至少1mm,例如在1mm至6mm的范围内。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其中所述一个或多个珠由具有表面电荷的粗糙或光滑的材料形成;和/或其中所述一个或多个珠由玻璃形成或为陶瓷珠。
4.根据前述权利要求中任一项所述的试剂盒,其中所述一个或多个珠是球形的。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其中,所述一个或多个珠的直径为至少200μm,任选地至少1mm,例如在1mm至6mm的范围内。
6.根据权利要求4或5所述的试剂盒,其中所述珠保持管的所述一个或多个出口开口是圆形的,并且直径小于所述珠的直径;任选地,其中所述一个或多个球形珠每个的直径为至少1mm,并且所述一个或多个圆形出口开口的直径为至少0.5mm但小于1mm。
7.根据前述权利要求中任一项所述的试剂盒,其包括1-50个球形珠,每个球形珠的直径在1mm-6mm的范围内,其中所述试剂盒中的珠数量与所述珠的直径成反比;并且其中所述珠保持管的体积足够大以容纳所述珠。
8.根据前述权利要求中任一项所述的试剂盒,其中,所述试剂盒进一步包括外管,其中所述珠保持管装配到所述外管中;任选地,其中所述外管的体积为1ml-2ml。
9.根据前述权利要求中任一项所述的试剂盒,其中所述试剂盒进一步包括:洗脱缓冲液,所述洗脱缓冲液适合于去除粘附至所述珠的DNA;洗涤缓冲液,所述洗涤缓冲液用于从粘附在所述珠上的所述DNA中去除污染物;和/或裂解缓冲液,所述裂解缓冲液用于裂解来自生物液或组织的细胞。
10.一种组合物,其包含:
(a)一个或多个最小尺寸为至少200μm的珠;
(b)DNA溶液,其包括中值大小为至少35kb的DNA;和
(c)DNA沉淀剂。
11.根据权利要求10所述的组合物,其中:
所述一个或多个珠的最小尺寸为至少1mm,例如最小尺寸在1mm至6mm的范围内;或
所述一个或多个珠是球形的,并且直径为至少200μm,例如至少1mm,例如在1mm至6mm的范围内;任选地,其中所述一个或多个球形珠是1-50个球形珠和/或其中所述一个或多个球形珠是球形玻璃珠。
12.根据权利要求10或11所述的组合物,其中所述DNA溶液获自细胞裂解物,例如其中所述DNA溶液是来自细胞裂解物的净化反应的产物;或
其中所述DNA溶液是细胞裂解物或组织裂解物。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的组合物,其中所述DNA沉淀剂选自醇、离液盐和群集剂。
14.根据权利要求10-13中任一项所述的组合物,其中所述一个或多个珠、所述DNA溶液和所述DNA沉淀剂包含在珠保持管中,其中所述DNA粘附至所述珠。
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