[发明专利]基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条

说明书

本发明公开了一种基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条，涉及试纸条技术领域。本发明包括：上转换发光纳米材料通过聚丙烯酸改性表面具有羧基基团后连接氨基修饰的犬细小病毒适配体形成上转换适配体探针UCNPs‑Apt CPV1；将犬细小病毒适配体识别序列的互补序列与非识别序列的互补序列通过链霉亲和素固定在硝酸纤维素膜的检测线及质控线上。本发明通过在结合垫上包被有上转换发光纳米材料，上转换发光纳米材料通过聚丙烯酸改性、表面具有羧基基团后连接氨基修饰的犬细小病毒适配体形成上转换适配体探针、上转换发光纳米材料与犬细小病毒适配体偶联，获得上转换适配体探针，提升检测的准确率；生产成本低于传统生产成本。

技术领域

本发明属于试纸条技术领域，特别是涉及基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条。

背景技术

随着纳米技术的发展，越来越多的纳米材料被用作标记物应用于分析检测工作中。1966年Auzzel在研究钨酸钠镱玻璃时首次提出上转换发光的观点。在之后的研究中，上转换发光纳米材料因具有特殊的光学性能越来越受到研究者们的关注，尤其作为信号标记物，在提高检测灵敏度方面起到关键作用。

上转换发光材料是一种能将低能光子转换成高能光子的发光材料，一般是指将吸收波长大于900nm的红外光转换成波长小于750nm可见光的材料，这种现象被称作现象被称之为反斯托克斯现象。上转换材料通常是由激活剂离子、敏化剂离子和基质材料组成。其中敏化剂将自身吸收的能量传递给激活剂，用于激活剂离子的发光，成为发光中心，上转换基质材料在其中充当支架的作用，固定敏化剂和激活剂，给能量传递提供一个合适的晶场。现提供基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条，提升检测的准确率。

发明内容

本发明的目的在于提供基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条，通过将上转换发光纳米材料通过聚丙烯酸改性，使其表面具有羧基基团后连接氨基修饰的适配体形成上转换适配体探针UCNPs-Apt CPV1；将适配体识别序列与非识别序列的互补序列DNACPV和DNA poly A通过链霉亲和素固定在硝酸纤维素膜的检测线(T线)及质控线(C线)上，提升检测的准确率。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为基于适配体识别的犬细小病毒上转换层析试纸条，包括依次相连的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫以及位于下方作为组装平台的PVC底板，所述分析膜为硝酸纤维素膜，所述分析膜上设有检测线及质控线，所述结合垫上包被有上转换发光纳米材料，所述上转换发光纳米材料包括上转换发光纳米材料UCNPs1、上转换发光纳米材料UCNPs2、上转换发光纳米材料UCNPs3；所述上转换发光纳米材料通过聚丙烯酸改性、表面具有羧基基团后连接氨基修饰的犬细小病毒适配体形成上转换适配体探针UCNPs-Apt CPV1；所述上转换发光纳米材料与犬细小病毒适配体偶联，获得上转换适配体探针UCNPs1-Apt CPV1、UCNPs2-Apt CPV1和UCNPs3-Apt CPV2；将犬细小病毒适配体识别序列的互补序列DNA CPV与非识别序列的互补序列DNA poly A通过链霉亲和素固定在硝酸纤维素膜的检测线及质控线上。

进一步地，所述上转换发光纳米材料的制备方法为：

步骤SS1：采用高温热分解法合成上转换发光纳米材料UCNPs1；

步骤SS2：选用聚丙烯酸作为配体交换剂，在常温下对上转换发光纳米材料UCNPs1进行羧基化修饰；

步骤SS3：采用水热法合成上转换发光纳米材料UCNPs2；

步骤SS4：选用聚丙烯酸作为配体交换剂，在常温下对上转换发光纳米材料UCNPs2进行羧基化修饰；

步骤SS5：采用水热法合成上转换发光纳米材料UCNPs3；

步骤SS6：对上转换发光纳米材料UCNPs3进行氨基修饰。