[发明专利]一种利用白酒糟生产屎肠球菌的技术方法

权利要求书

1.一种利用白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取屎肠球菌冻干菌粉置于改良MRS培养基中，划线培养，挑取3-5个典型屎肠球菌单菌落连续纯化传代复壮3次，选取最优屎肠球菌单菌落，作为一级种子液菌种；

(2)无菌操作挑取筛选的屎肠球菌单菌落接种于一级种子培养液中，摇床培养得一级种子液；然后进一步接种到二级种子培养液中培养获得二级种子液；

(3)将制备好的二级种子液接种到含有经预处理的白酒糟的固态发酵培养基中，发酵培养；

(4)发酵结束后，将发酵产物烘干粉碎得屎肠球菌固态发酵产品；

以质量份数计，步骤(3)中含有经预处理的白酒糟的固态发酵培养基中含有以下成分：经过预处理的白酒糟30-60份，酵母浸粉0.1-2份，硫酸镁0-1份，硫酸锰0-1份，水30-40份，pH值6-7.5，高温灭菌；接种量5-10％；

所述预处理的白酒糟的制备方法包括以下步骤：

①将鲜白酒糟分筛出稻壳后置于水中，调节pH值为6-8，浸泡处理后干燥、粉碎过筛得白酒糟粉；

②所得白酒糟粉和玉米淀粉加水调和均匀后进行膨化处理，粉碎过筛得膨化白酒糟/玉米淀粉混合物；

步骤①中，浸泡时间12-48h，浸泡温度为60-80℃，粉碎过40目筛。

2.根据权利要求1所述的白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，其特征在于，以质量份数计，步骤(1)中，MRS培养基包含以下成分：葡萄糖1-2份，蛋白胨0.5-1.5份，牛肉膏0.5-1.5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化钠0.2-0.8份，琼脂粉1-3份，碳酸钙0.1-3份，柠檬酸二铵0.1-1份，吐温0.08-0.1份，硫酸镁0.02-0.1份，硫酸锰0.01-0.05份，纯化水85-96份；培养条件为35-37℃。

3.根据权利要求1所述的白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，其特征在于，以质量份数计，步骤(2)中的一级培养基包含以下组分：蔗糖1-2份，葡萄糖1-2份，蛋白胨0.5-1.5份，碳酸钙1-5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化钠0.2-0.8份，牛肉膏0.5-1.5份，硫酸镁0-0.8份，硫酸锰0.1-0.8份，磷酸氢二钾0.8-3.5份，纯化水86-95份；

二级培养基包含以下组分：蔗糖2-3份，葡萄糖0-1.5份，蛋白胨0.5-1.5份，碳酸钙1-5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化钠0.2-0.8份，牛肉膏0.5-1.5份，硫酸镁0-0.8份，硫酸锰0.1-0.8份，磷酸氢二钾0.8-3.5份，纯化水86-95份；

一级种子液接种至二级培养基的接种量为5-10％；

培养条件为30-40℃，制备一级种子液的培养时间为8-12h，制备二级种子液的培养时间为12-24h。

4.根据权利要求1所述的白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，其特征在于，步骤②中，白酒糟和玉米粉的混合比例为(6-8)∶2，加水量为白酒糟粉和玉米淀粉混合物总量的30-50％。

5.根据权利要求1所述的白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，其特征在于，步骤②中，膨化温度为100-150℃，膨化处理后粉碎过60目筛。