[发明专利]一种表达鸡VP2和鸡GAL-1融合蛋白的重组CHO细胞株及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202010849124.2 | 申请日： | 2020-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN111925449B | 公开（公告）日： | 2022-02-01 |
| 发明（设计）人： | 刘喜凤;周佳彬;曹玉飞;杨闯;刘燕;郑杰;马宁宁 | 申请（专利权）人： | 浙江鼎持生物制品有限公司;北京鼎持生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N5/10;C12N15/62;C12N15/85;C12N15/66;A61K39/12;A61K38/17;A61K47/55;A61P31/14;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京金宏来专利代理事务所(特殊普通合伙) 11641 | 代理人： | 左海明 |
| 地址： | 311800 浙江省绍*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表达 vp2 gal 融合 蛋白 重组 cho 细胞株 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种鸡VP2和鸡GAL-1融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为VP2-GAL1融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码该蛋白的基因序列为VP2-GAL1序列,如SEQ ID NO.1所示。
2.一种表达权利要求1所述的鸡VP2和鸡GAL-1融合蛋白的重组CHO细胞株，其特征在于，所述重组CHO细胞株为CHO-B40-VP2-GAL1-80#株，该细胞株保藏名称为CHO-B40-VP2-80#，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.19959。
3.如权利要求2所述的CHO细胞株在制备鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗中的应用。
4.如权利要求2所述的CHO细胞株用于制备鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗的方法，其特征在于，将重组CHO细胞株CHO-B40-VP2-GAL1-80#经过无血清悬浮放大培养后，离心，收集细胞沉淀，用PBS溶解，纯化获得VP2-GAL1融合蛋白，测定VP2-GAL1融合蛋白含量和琼扩效价，并与疫苗佐剂按1:2比例混合，得到鸡传染性法氏囊VP2-GAL1亚单位疫苗。
5.根据权利要求4所述的制备鸡传染性法氏囊亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述VP2-GAL1融合蛋白琼扩效价为1:8～1:32。
6.根据权利要求5所述的制备鸡传染性法氏囊亚单位疫苗的方法，其特征在于，所述VP2-GAL1融合蛋白琼扩效价为1:16。
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