[发明专利]真菌核酸提取裂解液及提取核酸的试剂盒及方法

权利要求书

1.真菌核酸提取裂解液，其特征在于，包括以下组分和用量：

1～5mM的氢氧化钠；

40-70mM的Tris-HCl；

200-400mM异硫氰酸胍；

150～300mM NaCl；

30～80mM十二烷基硫酸钠；

pH调节剂及溶剂；

所述pH调节剂调节所述裂解液的pH为7～8。

2.根据权利要求1所述的真菌核酸提取裂解液，其特征在于，所述pH调节剂为磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1所述的真菌核酸提取裂解液，其特征在于，所述溶剂为水。

4.根据权利要求1所述的真菌核酸提取裂解液，其特征在于，所述NaCl的浓度为200～250mM。

5.根据权利要求1所述的真菌核酸提取裂解液，其特征在于，所述异硫氰酸胍的浓度为250～350mM。

6.一种微生物病原体裂解试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

如权利要求1～5任一项所述的裂解液；

至少一个容纳所述裂解液的容器。

7.一种真菌快速裂解提取核酸的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

S1：将真菌菌丝加入权利要求1～5任一项所述的裂解液中，在40～70℃下水浴加热5～10min后离心，得上清液；

S2：将萃取剂加入所述步骤S1的上清液中抽提DNA，再次离心；

S3：将DNA沉淀剂加入步骤S2离心所得的上清液中混合均匀，静置后离心沉淀DNA；

S4：将DNA沉淀用70％～75％的乙醇洗涤后干燥。

8.根据权利要去7所述的真菌快速裂解提取核酸的方法，其特征在于，所述的步骤S2中萃取剂为氯仿和异丙醇的混合溶剂；所述步骤S2中所述萃取剂与步骤S1所述上清液体积比为1∶1。

9.根据权利要去7所述的真菌快速裂解提取核酸的方法，其特征在于，所述的步骤S3中DNA沉淀剂为无水乙醇；所述步骤S3中DNA沉淀剂加入步骤S2所述的上清液体积比为1∶1。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述样品选自：菌液、全血、血清、血浆、尿液、唾液、咽拭子、粪便，或其组合。