[发明专利]一种新型微生物核酸纯化工艺

权利要求书

1.一种新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，包括以下步骤：

S1：磁珠预处理：将硅羟基磁珠微粒摇匀，吸入离心管中，磁分离，弃上清，得到预处理的硅羟基磁珠微粒；

S2：混合：吸取DNA结合液和样本加入步骤S1得到的预处理后的硅羟基磁珠微粒中，超声混匀后静置，磁分离，弃上清，得到物质A；

S3：取第一纯化剂加入所述步骤S2得到的物质A中，超声混匀后静置，磁分离，弃上清，得到物质B，重复此步骤一次，得到物质C；

S4：取第二纯化剂加入步骤S3得到的物质C中，超声混匀后静置，磁分离，弃上清，得到物质D，重复此步骤一次，得到物质E；

S5：取洗脱液缓慢加入步骤S4得到的物质E中，静置，保持磁力吸附，弃上清，得到物质F；

S6：取洗脱液加入步骤S5得到的物质F中，超声混匀，静置后再超声混匀，磁力吸附，吸取上清液溶解冻干beads进行荧光PCR检测。

2.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述步骤S1中，所述的磁珠为硅羟基修饰的磁珠浓度为20-30mg/mL，所述的磁珠的粒径为300-800nm。

3.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述步骤S2中DNA结合液和样品的体积比为60：40。

4.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述步骤S2～S4以及S6中超声条件为40～60w，超声5～10min。

5.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述步骤S5和S6中，所述洗脱液为10mM Tris-HCl，所述洗脱液的pH为7～9。

6.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述DNA结合液包括8M盐酸胍、0.3M醋酸钠、1％Triton X-100以及1％的十二烷基硫酸钠。

7.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述第一纯化剂包括6M尿素、0.30M醋酸钠、2.0％Triton X-100、5mM的Tris-HCl。

8.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述第二纯化剂包括体积分数为70％的乙醇、0.15M醋酸钠pH为4.5、15mM柠檬酸钠。

9.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述步骤S1中所述硅羟基磁珠微粒的量为5～10μl。

10.根据权利要求1所述的新型微生物核酸纯化工艺，其特征在于，所述第一纯化剂加入量为50～100μl；所述第二纯化剂加入量为50～100μl；所述洗脱液的加入量为50～100μl。