[发明专利]高含量2-异丙基苹果酸在松花粉真实性评价中的应用

权利要求书

1.高含量2-异丙基苹果酸在松花粉真实性评价中的应用，其特征在于，所述高含量为18-35 mg/kg。

2.一种松花粉的真实性评价方法，其特征在于，以2-异丙基苹果酸为特征化合物，若花粉样本2-异丙基苹果酸含量介于18-35 mg/kg，判断所述花粉样本为松花粉；若花粉样本2-异丙基苹果酸含量低于18 mg/kg，则判定所述花粉样本为其它花粉或者掺假松花粉。

3.根据权利要求2所述的真实性评价方法，其特征在于，在检测前，包括利用甲醇对所述花粉样本进行提取的步骤。

4.根据权利要求2所述的真实性评价方法，其特征在于，采用UHPLC-Q-Orbitrap和/或LC-MS/MS检测花粉样本。

5.根据权利要求4所述的真实性评价方法，其特征在于，2-异丙基苹果酸在UHPLC-Q-Orbitrap的精确提取离子流色谱图中含有准分子离子峰m/z 175.06120 ([M-H]^-)，其精确质量数的误差应当小于5 ppm；2-异丙基苹果酸色谱峰的保留时间为5.60 min，保留时间偏差小于0.2 min。

6.根据权利要求4所述的真实性评价方法，其特征在于，2-异丙基苹果酸的MS/MS图谱中应含有m/z 115.03832、m/z 85.06421、m/z 113.05926中的一个或多个碎片离子峰，其精确质量数的误差应当小于10 ppm。

7.根据权利要求4或5所述的真实性评价方法，其特征在于，采用UHPLC-Q-Orbitrap对花粉样本进行检测时，液相色谱条件如下：

采用C18色谱柱，以0.1%的甲酸水为流动相A，0.1%的甲酸乙腈为流动相B，采用梯度洗脱程序分离：0-2.0 min， 5% 的流动相B；2.0-7.0 min， 5-30% 的流动相B；7.0-14.0 min，30-95% 的流动相B；14.0-18.0 min， 95% 的流动相B；18.0-18.1 min， 95-5% 的流动相B；18.1-20.0 min，5% 的流动相B。

8.根据权利要求4或5所述的真实性评价方法，其特征在于，采用UHPLC-Q-Orbitrap对花粉样本进行检测时，质谱条件如下：

离子源参数：鞘气流速45 arb；辅助气的流速10 arb；挡锥气的流速0 arb；电喷雾电压3.5 kV；离子导管的温度320 ℃；S-lens RF level设为 60 V；离子源的温度350 ℃；采集的模式为负离子模式下的Full MS-ddMS²，扫描范围80-1200 Da，碰撞能量为35 eV。

9.根据权利要求4所述的真实性评价方法，其特征在于，采用LC-MS/MS对松花粉样本进行检测时，液相条件如下：采用C18色谱柱，柱温25℃，以0.1%的甲酸水为流动相A，0.1%的甲酸乙腈为流动相B；采用梯度洗脱程序分离：0-0.8 min， 5% 的流动相B；0.8-1.2 min， 5-40% 的流动相B；1.2-2.5 min， 40-90% 的流动相B；2.5-3.5 min， 90% 的流动相B；3.5-3.6 min， 90-5% 的流动相B；3.6-6.0 min， 5% 的流动相B。

10.根据权利要求4所述的真实性评价方法，其特征在于，采用LC-MS/MS对花粉样本进行检测时，质谱条件如下：电喷雾离子源；扫描方式：负离子扫描；监测方式：多反应监测；离子喷雾电压：3500 V；雾化气压力：45 psi；干燥气温度：300 ℃；干燥气流速：5 L/min；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11 L/min；采集的模式为负离子模式下的MRM，其参数如下：175.1115.0，9 eV，175.185.1，16 eV。