[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法

权利要求书

1.一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、将鼠李糖乳杆菌接种于含葡萄糖的脱脂乳液体培养基中，在恒温培养箱静置发酵；

(2)、将发酵好的培养基进行沸水浴，使其中菌体和酶失活，蛋白质变性，取出冷却至室温，低温离心取上清液；

(3)、对上清液蒸发浓缩至原体积的1/3，得到第一次浓缩液，然后加入质量浓度80％的三氯乙酸到第一次浓缩液中，三氯乙酸最终质量浓度为4％，静置使蛋白质充分沉淀，低温离心取上清液；

(4)、对上清液蒸发浓缩至原体积的1/3，得到第二次浓缩液，然后加入预冷的质量浓度95％乙醇，乙醇与第二次浓缩液体积比3:1，静置使多糖充分沉淀，然后低温离心弃上清液取沉淀；

(5)、将沉淀转移至透析袋，用去离子水透析；

(6)、将透析好的胞外多糖进行真空冷冻干燥，最终得到白色絮状物即为粗多糖。

2.根据权利要求1所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：鼠李糖乳杆菌的接种量为3％。

3.根据权利要求1或2所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，脱脂乳液体培养基每升含有：脱脂奶粉100g和葡萄糖10g。

4.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，静置发酵为在37℃、36小时静置发酵。

5.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中，低温离心条件为：4℃，10000×g离心15分钟。

6.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(3)和(4)中，蒸发浓缩条件为：60～65℃，减压浓缩。

7.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(3)和(4)中，4℃静置12小时。

8.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，所述低温离心条件为：4℃，10000×g离心20分钟。

9.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，透析袋使用前于沸水中煮10分钟，规格为8000–14000Da。

10.根据权利要求3所述的一种鼠李糖乳杆菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，将沉淀转移至透析袋在4℃环境中用去离子水透析3天，每隔12小时换一次水。