[发明专利]一种t-PAI-C标志物检测试剂盒及其配制方法在审
申请号: | 202010860776.6 | 申请日: | 2020-08-23 |
公开(公告)号: | CN111983239A | 公开(公告)日: | 2020-11-24 |
发明(设计)人: | 颜克亮;邹刚军;陈文华 | 申请(专利权)人: | 深圳市巨东生物医学工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/564;G01N33/543 |
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地址: | 518118 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 pai 标志 检测 试剂盒 及其 配制 方法 | ||
1.一种t-PAI-C标志物检测试剂盒,其特征在于:互相独立包装的试剂1、试剂2、磁微粒试剂、校准品1、校准品2,所述试剂1的浓度为0.05~1μg/mL,所述磁微粒试剂浓度为340~360ng/mL,校准品1浓度为5ng/mL,校准品2浓度为50ng/mL。
2.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒,其特征在于:试剂1的制备方法如下:
取1mg组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物抗体,用缓冲液(PH7.0~8.5)在4℃或室温超滤;
将超滤后的组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物抗体加入0.05mg生物素,再加入缓冲液(PH7.0~8.5)使抗体终浓度为0.05~1μg/mL,混匀5min;
将混合液置于恒温箱24~26℃,静置反应110~130min,使用缓冲液(PH7.0~8.5)于4℃或室温透析生物素化抗体16-24h。
3.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒,其特征在于:所述试剂2的制备方法如下:
室温条件下,向一定体积的纯化水中加入6.06gTris、9.0g氯化钠和3.8mL浓HCl,至少搅拌5min至完全溶解;然后加入1.0mL表面活性剂和5mL防腐剂;最后缓慢加入10.0g动物血清白蛋白,至少搅拌10min至完全溶解,待所有成分完全溶解后,调节pH值在7.1~7.3,纯化水定容至1L。
4.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒,其特征在于:所述磁微粒试剂的制备方法如下:
取1mg组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物标记抗体,用缓冲液(PH7.0~8.5)于室温或2~8℃超滤一次,把超滤好的组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物标记抗体用缓冲液(PH7.0~8.5)将抗体稀释到1mg/mL,取0.1mg吖啶酯,把抗体与吖啶酯快速混合,再加入缓冲液(PH7.0~8.5)使抗体终浓度为0.5mg/mL,混匀5min;将溶液置于恒温箱23~27℃,静置反应110~130min,反应全程需避光,使用脱盐柱进行纯化,纯化好的吖啶酯标记抗体用t-PAI-C吖啶酯标记保存液稀释至340~360ng/mL,2-8℃保存待用。
5.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒,其特征在于:所述校准品1和校准品2组份相同浓度不同分别为5ng/mL和50ng/mL,皆由组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物用1%~5%动物血清白蛋白溶液配制成校准品并冻干,赋值而成。
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