[发明专利]一种t-PAI-C标志物检测试剂盒及其配制方法在审
| 申请号： | 202010860776.6 | 申请日： | 2020-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN111983239A | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 颜克亮;邹刚军;陈文华 | 申请（专利权）人： | 深圳市巨东生物医学工程有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/564;G01N33/543 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518118 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 pai 标志 检测 试剂盒 及其 配制 方法 | ||
1.一种t-PAI-C标志物检测试剂盒，其特征在于：互相独立包装的试剂1、试剂2、磁微粒试剂、校准品1、校准品2，所述试剂1的浓度为0.05～1μg/mL，所述磁微粒试剂浓度为340～360ng/mL，校准品1浓度为5ng/mL，校准品2浓度为50ng/mL。
2.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒，其特征在于：试剂1的制备方法如下:
取1mg组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物抗体，用缓冲液(PH7.0～8.5)在4℃或室温超滤；
将超滤后的组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物抗体加入0.05mg生物素，再加入缓冲液(PH7.0～8.5)使抗体终浓度为0.05～1μg/mL，混匀5min；
将混合液置于恒温箱24～26℃，静置反应110～130min,使用缓冲液(PH7.0～8.5)于4℃或室温透析生物素化抗体16-24h。
3.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒，其特征在于：所述试剂2的制备方法如下:
室温条件下，向一定体积的纯化水中加入6.06gTris、9.0g氯化钠和3.8mL浓HCl，至少搅拌5min至完全溶解；然后加入1.0mL表面活性剂和5mL防腐剂；最后缓慢加入10.0g动物血清白蛋白，至少搅拌10min至完全溶解,待所有成分完全溶解后，调节pH值在7.1～7.3，纯化水定容至1L。
4.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒，其特征在于：所述磁微粒试剂的制备方法如下：
取1mg组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物标记抗体，用缓冲液(PH7.0～8.5)于室温或2～8℃超滤一次，把超滤好的组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物标记抗体用缓冲液(PH7.0～8.5)将抗体稀释到1mg/mL，取0.1mg吖啶酯，把抗体与吖啶酯快速混合，再加入缓冲液(PH7.0～8.5)使抗体终浓度为0.5mg/mL，混匀5min；将溶液置于恒温箱23～27℃，静置反应110～130min，反应全程需避光，使用脱盐柱进行纯化，纯化好的吖啶酯标记抗体用t-PAI-C吖啶酯标记保存液稀释至340～360ng/mL，2-8℃保存待用。
5.根据权利要求1所述的一种t-PAI-C标志物检测试剂盒，其特征在于：所述校准品1和校准品2组份相同浓度不同分别为5ng/mL和50ng/mL，皆由组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物用1％～5％动物血清白蛋白溶液配制成校准品并冻干，赋值而成。
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