[发明专利]一种快速检测菌株携带tet(X)基因的方法及其应用在审
| 申请号： | 202010862590.4 | 申请日： | 2020-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN112229896A | 公开（公告）日： | 2021-01-15 |
| 发明（设计）人： | 孙坚;郑子建;崔泽华;唐甜;钟子星;廖晓萍;刘雅红 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | G01N27/626 | 分类号： | G01N27/626;C12Q1/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 | 代理人： | 张丽 |
| 地址： | 510000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 菌株 携带 tet 基因 方法 及其 应用 | ||
1.一种快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)配制含抗生素的标准溶液，将其与待测菌株样品的菌苔混匀、孵育3～5h，孵育后离心；
(2)取离心上清液点靶，晾干后加入基质覆盖；
(3)设置MALDI-TOF MS参数：质谱范围1m/z～1000m/z，离子源20kV，线性反射器2.62kV，镜头6kV，激光频率50Hz，脉冲离子萃取延迟114ns；
(4)结果判定：若样品出现602m/z产物峰，判定该待检测菌株携带tet(X)基因；若样品未出现602m/z产物峰，判定该待检测菌株不携带tet(X)基因。
2.根据权利要求1所述的快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，所述抗生素为替加环素。
3.根据权利要求2所述的快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，步骤(1)标准溶液用0.5％NaCl溶液配制，浓度为50μg/ml。
4.根据权利要求1所述的快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，步骤(1)孵育的条件为：37℃、转速250rpm。
5.根据权利要求1所述的快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，步骤(1)混匀的操作为：取500ul标准溶液与一接种环的待测菌株的菌苔涡旋混匀。
6.根据权利要求1所述的快速检测菌株携带tet(X)基因的方法，其特征在于，步骤(1)离心的条件为：13000rpm，离心2min。
7.权利要求1至6任一项所述方法在筛选含tet(X)基因的菌株中的应用。
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