[发明专利]检测多瘤病毒并分型的组合物、试剂盒、方法及其用途有效
| 申请号： | 202010863551.6 | 申请日： | 2020-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN111733298B | 公开（公告）日： | 2020-11-20 |
| 发明（设计）人： | 范文洲;邱先锋;戴立忠;邓中平;刘佳;纪博知 | 申请（专利权）人： | 圣湘生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人： | 黄景辉;张颖玲 |
| 地址： | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 病毒 组合 试剂盒 方法 及其 用途 | ||
1.一种检测多瘤病毒并分型的组合物，所述组合物包括：
BKV-F1：5'-GGGGACCTAGTTGCCAGTGT-3'（SEQ ID NO:1）；
BKV-R1：5'-GGAGCACCAGCAATTACAGCA-3'（SEQ ID NO:2）；
BKV-P1：5'-TGCATCCCTTGCTACTGTAGAGGGCAT-3'（SEQ ID NO:3）；
JCV-F1：5'-ACACCCAAACCATTGTCTGAAGCA-3'（SEQ ID NO:4）；
JCV-R1：5'-TCCTTCAGTGCATTGCCCCTGT-3'（SEQ ID NO:5）；
JCV-P1：5'-CAATCTATCCACACAAGTGGGCTGCTTC-3'（SEQ ID NO:6）；
SV40-F1：5'-TCATTAAAGGCATTCCACCAC-3'（SEQ ID NO:7）；
SV40-R1：5'-TGTGTTAAACTACTGATTCTAATTGTTTG-3'（SEQ ID NO:8）；和
SV40-P1：5'-TCATTAAAGGCATTCCACCAC-3'（SEQ ID NO:9）；其中，所述组合物的探针的荧光基团不互相干扰。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物进一步包括：
IC-F1：5'-CAAGATCATCAGCAATGCCT-3'（SEQ ID NO:10）；
IC-R1：5'-AGTCCTTCCACGATACCAAA-3'（SEQ ID NO:11）；和
IC-P1：5'-CACCACCAACTGCTTAGCACCCCT-3'（SEQ ID NO:12）。
3. 根据权利要求1所述的组合物，其中，如SEQ ID NO:3所示的BKV探针的荧光基团为FAM；如SEQ ID NO:6所示的JCV探针的荧光基团为HEX；如SEQ ID NO:9所示的SV40探针的荧光基团为CY5。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的组合物，其中，所述组合物的各成分存在于同一个包装中。
5.权利要求1~4中任一项所述的组合物在制备用于检测多瘤病毒并分型的试剂盒中的用途。
6.一种用于检测多瘤病毒并分型的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1~4中任一项所述的组合物。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括核酸释放试剂、dNTP、DNA聚合酶、UNG酶、PCR缓冲液以及Mg2+中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其中，所述组合物中引物的用量为25~100nM；所述组合物中探针的用量为10~75nM。
9.一种用于以非诊断目的检测多瘤病毒并分型的方法，所述方法包括以下步骤：
1）释放待测样本的核酸；
2）使用如权利要求1~4中任一项所述的组合物对步骤1）获得的核酸进行荧光定量PCR；
3）获得并分析结果。
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