[发明专利]一种同时检测尿液中BTEX代谢产物的方法

权利要求书

1.一种同时检测尿液中BTEX代谢产物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(a)样品前处理：将尿液样品酸化后过滤；

(b)配制反,反式黏康酸、马尿酸、苯乙醇酸、苯乙醛酸以及甲基马尿酸的标准溶液；

(c)高效液相色谱测定：色谱柱为C18色谱柱；流动相为甲醇和0.5％的(乙酸+磷酸)混合液，洗脱方式为梯度洗脱；

(d)根据所述标准溶液经色谱系统获得的标准曲线的线性回归方程以及所述尿液样品的峰面积，计算得出所述尿液样品中各代谢产物的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述尿液样品为尿液比重为1.010-1.030的样品。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述酸化采用盐酸缓冲液，优选地，所述盐酸缓冲液为浓盐酸与水体积比1:1的缓冲液；更优选地，所述酸化时间为10min以上；所述尿液样品的体积为缓冲液体积的50-150倍，更优选100倍；酸化后的样品通过滤膜过滤，优选0.22μm滤膜。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中，所述C18色谱柱采用TC-C18反向色谱柱；柱温为32-35℃，优选32℃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中，所述样品进样量为1-10μL，优选10μL；流动相流速为0.5-1mL/min，优选1mL/min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：

0-3min，甲醇20％，乙酸+磷酸混合液80％；

3-12min，甲醇20％，乙酸+磷酸混合液80％；

12-22min，甲醇40％，乙酸+磷酸混合液60％；

22-25min，甲醇80％，乙酸+磷酸混合液20％；

25-26min，甲醇80％，乙酸+磷酸混合液20％；

26min，甲醇20％，乙酸+磷酸混合液80％。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中，所述高效液相色谱采用紫外检测器，紫外灯检测波长为237nm。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准溶液的配制方法为：利用甲醇溶解反,反式黏康酸，利用去离子水溶解马尿酸、苯乙醇酸、苯乙醛酸、甲基马尿酸标准品，并稀释成1、5、10、20、40、80mg/ml的标准溶液。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲基马尿酸包括2-甲基马尿酸、3-甲基马尿酸和4-甲基马尿酸。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(a)中，所述尿液样品的体积为5-15mL，优选为10mL。