[发明专利]一种砂仁药材指纹图谱的检测方法

权利要求书

1.一种砂仁药材指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括下述步骤：

1)将砂仁药材冷藏保存后粉碎过筛，与提取溶剂按照1～5g:10～30mL的比例混合，形成样液；

2)将上述步骤1)得到的样液超声提取10～45min，与净化剂按照1ml:4～50mg的比例混合；所述净化剂为PSA和石墨化碳的混合物，所述PSA和石墨化碳的质量比为1:1～5。

3)将所述步骤2)得到的上清液用微孔滤膜过滤，得供试品溶液；

4)将所述步骤3)得到的供试品溶液进行气相色谱分析，获得色谱图和特征峰的保留时间。

5)将C₈-C₂₀正构烷烃标准溶液采用与步骤4)同样的色谱条件，进行气相色谱分析，获得色谱图和C₈-C₂₀正构烷烃的保留时间；

6)将所述步骤4)中特征峰的保留时间和步骤5)中C₈-C₂₀正构烷烃的保留时间代入公式，计算特征峰的保留指数；

7)将所述步骤6)所得的保留指数与理论保留指数进行比对，对特征峰进行定性；

8)将所述步骤7)中定性后的特征峰化合物用乙酸乙酯溶解，制备成对照品混合溶液；

9)将所述步骤8)得到的对照品混合溶液采用与步骤4)同样的色谱条件，进行气相色谱分析，获得对照品色谱图和保留时间；

10)将所述步骤9)获得的对照品色谱图和保留时间，对步骤4)的特征峰进行定性确认；

11)将10批不同批次的同品种砂仁药材按步骤1)～步骤4)进行分析，对特征峰进行指认，并将色谱图导入中药指纹图谱数据库进行相似度评价，生成对照指纹图谱；

12)将待测砂仁药材样品按步骤1)～步骤4)进行分析，对特征峰进行指认，并将色谱图导入中药指纹图谱数据库进行相似度评价，与所述步骤11)中得到的对照指纹图谱进行对比，计算相似度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中提取溶剂为乙酸乙酯，砂仁药材粉末与乙酸乙酯按照5g:25mL的比例混合。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中超声提取30min，提取溶剂乙酸乙酯的体积与净化剂的质量比为25mL:550mg；PSA和石墨化碳的质量比为1:1.75。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中气相色谱分析参数包括色谱柱固定相为(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷；进样口温度为250℃，载气：氮气，纯度≥99.999％，分流比为10:1，恒流模式，流速1.0mL/min，进样量1μL；柱温初温为80℃，保持1min，以5℃/min升至180℃，再以30℃/min升至270℃，保持9min；检测器：氢火焰离子化检测器，温度为260℃。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中指纹图谱共有11个特征峰，所述特征峰与参照峰8号峰的相对保留时间为：1号峰：0.3752±0.0003；2号峰：0.3960±0.0004；3号峰：0.4324±0.0004；4号峰：0.4399±0.0003；5号峰：0.5048±0.0003；6号峰：0.7195±0.0002；7号峰：0.7558±0.0004；8号峰为参照峰(P8)：1.0000；9号峰：1.1389±0.0001；10号峰：1.1845±0.0003；11号峰：1.2766±0.0003。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，保留指数计算公式为RI＝100×{n+[t(x)-t(n)]/[t(n+1)-t(n)]},式中RI为保留指数；n为正构烷烃的碳原子数；t(n+1)、t(n)分别代表碳数为n+1、n的正构烷烃的保留时间(min)；t(x)为被测组分保留时间(min)，且t(n+1)＞t(x)＞t(n)；经保留指数计算与比对，所述步骤4)供试品溶液中1-11号峰分别为1号峰：α-蒎烯；2号峰：莰烯；3号峰：β-蒎烯；4号峰：β-月桂烯；5号峰：D-柠檬烯，6号峰：樟脑；7号峰：龙脑；8号峰：乙酸龙脑酯；9号峰：丁香酚；10号峰：α-古巴烯；11号峰：石竹烯。