[发明专利]用于小片段核酸纯化筛选的方法

权利要求书

1.一种用于小片段核酸纯化筛选的方法，其特征在于，包括以下步骤：利用核酸纯化磁珠通过控制PEG8000和异丙醇百分比浓度配比进行第一轮纯化，收取磁珠上清液回收N nt以下的核酸片段，其中，N100。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：利用核酸纯化磁珠通过控制PEG8000和异丙醇百分比浓度配比对所述磁珠上清液进行第二轮纯化，回收所述核酸纯化磁珠上所吸附的核酸片段，所述核酸片段的长度大于M nt，NM。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，调整PEG8000百分比浓度在6％～7.5％之间，异丙醇百分比浓度在31％～35％之间，采用XP磁珠进行所述第一轮纯化，吸附65nt及65nt以上的核酸片段，收取磁珠上清液回收65nt以下核酸片段。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，调整PEG8000百分比浓度在6％-8.5％之间，异丙醇浓度在38％～41％之间，采用XP磁珠进行第二轮纯化，吸附45nt及45nt以上的核酸片段。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，对获取的核酸片段进行凝胶电泳验证。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述第一轮纯化之前还包括：

核酸样本起始量的确定：设计不同长度的单链DNA序列，制备25～95nt不同长度DNA的混合液，评估预定基础磁珠体积、预定PEG8000和异丙醇的百分比浓度条件下核酸样本最佳起始量。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在所述第一轮纯化之前还包括：固定异丙醇百分比浓度，设置不同PEG8000百分比浓度，评估PEG8000对小片段核酸纯化的效果，确定合适的核酸片段长度范围。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，固定异丙醇百分比浓度为35％。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在所述第一轮纯化之前还包括：评估适合小片段核酸纯化的PEG8000和异丙醇百分比浓度配比。