[发明专利]顺铂耐药肺癌类器官及其培养方法、培养用培养基和用途

说明书

本公开涉及一种培养顺铂耐药肺癌类器官的方法，该方法包括将顺铂耐药肺癌组织细胞与培养基和基质胶混合，得到待培养物，其中，所述培养基中含有基质金属蛋白酶‑10，以所述培养基为基准，所述基质金属蛋白酶‑10的浓度为50～200nM；对所述待培养物进行培养扩增，得到顺铂耐药肺癌类器官。本公开提供的顺铂耐药肺癌类器官的培养方法中，由于所采用的培养基中含有特定浓度的基质金属蛋白酶‑10，该特定浓度的基质金属蛋白酶‑10能够促进顺铂耐药肺癌类器官的体外生长，因此，利用本公开提供的方法进行顺铂耐药肺癌类器官培养时，培养成功率较高。

技术领域

本公开涉及生物医药技术领域，具体涉及一种培养顺铂耐药肺癌类器官的方法、一种用于顺铂耐药肺癌类器官培养的培养基、顺铂耐药肺癌类器官及其在药物筛选中的应用。

背景技术

顺铂又名顺-双氯双氨络铂，是一种临床上广泛使用的抗癌化疗药物，具有广谱抗瘤性，自问世以来，顺铂在肺癌、睾丸癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌等肿瘤疾病的治疗中均具有较好的治疗效果。然而，在利用顺铂进行化疗的过程中，会产生顺铂耐药现象，容易导致化疗失败，使顺铂在肿瘤化疗中的使用受到了巨大限制。

肺癌是全球范围内较为常见的一种恶性肿瘤，其致死人数占全部肿瘤死亡人数的18.4％左右。肺癌顺铂耐药的分子机制复杂，除主要与耐药相关基因改变、细胞解毒和DNA损伤修复基因改变有关外，还与染色体改变、凋亡相关基因改变、细胞骨架、血管形成及细胞外基质密度异常有关。在体外建立顺铂耐药肺癌生物模型是研究肺癌顺铂耐药机制、开发靶向药物及寻找化疗增敏剂的基础和前提。

相关技术中，通常采用顺铂耐药肺癌细胞株作为体外顺铂耐药肺癌生物模型。目前，建立肿瘤耐药细胞株的常用方法主要包括药物浓度递增持续作用法和大剂量药物间歇诱导法两种。药物浓度递增持续作用法通常需要6个月或更长的时间来诱导耐药，耗时较长，且其化疗药物的作用方式与临床上化疗药物大剂量、短疗程的化疗原则存在明显差异。大剂量药物间歇诱导法在诱导耐药时药物浓度很高，细胞往往难以耐受骤变的培养环境，诱导成功率低，且导致细胞状态较难控制，耐药性能不稳定。另外，此两种方法诱导的耐药细胞株在细胞形态和生物学特性上存在明显差别，属于不同细胞亚系，导致在此两种耐药细胞株中进行药物筛选获得的数据往往相差迥异。

建立与顺铂耐药肺癌患者体内的肺癌原生组织更相似的顺铂耐药肺癌生物模型，对寻找和开发顺铂增敏剂或顺铂耐药逆转剂具有重要的临床应用价值。

发明内容

本公开的目的是提供一种培养顺铂耐药肺癌类器官的方法、一种用于顺铂耐药肺癌类器官培养的培养基、顺铂耐药肺癌类器官及其在药物筛选中的应用。

为了实现上述目的，第一方面，本公开提供一种培养顺铂耐药肺癌类器官的方法，该方法包括：

将顺铂耐药肺癌组织细胞与培养基和基质胶混合，得到待培养物，其中，所述培养基中含有基质金属蛋白酶-10，以所述培养基为基准，所述基质金属蛋白酶-10的浓度为50～200nM；

对所述待培养物进行培养扩增，得到顺铂耐药肺癌类器官。

可选地，所述待培养物中，所述顺铂耐药肺癌组织细胞的浓度为1×10⁴～5×10⁴个/mL，所述基质胶的含量为1～20体积％。

可选地，所述培养基中还含有Advanced DMEM/F 12培养基、FBS、青链霉素、Noggin、FGF7、B27、Nicotinamide和EGF中的至少一种。

可选地，以所述培养基为基准，所述FBS的含量为5～10体积％，所述青链霉素的浓度为50～100μg/ml，所述Noggin的浓度为50～150ng/ml，所述FGF7的浓度为1～10ng/ml，所述B27的含量为1～5体积％，所述Nicotinamide的浓度为1～10mM，所述EGF的浓度为1～10ng/ml，余量为所述Advanced DMEM/F 12培养基。