[发明专利]化学发光免疫磁球及其制备方法

说明书

本发明阐述了一种化学发光免疫磁性微球，包括有表面化学修饰有对甲苯磺酰化基团的磁性微球，同抗原或抗体偶联所得。还公开了该化学发光免疫磁性微球的制备方法，包括：聚合以获得表面具有多孔结构的聚苯乙烯的乳胶粒子；乳胶粒子与亚铁盐的水溶液混合，通过原位还原法制备磁性复合体；将磁性复合体经羟基化改性，得到羟基化磁性微球；将羟基化磁性微球与对甲苯磺酰氯反应，即得到对甲苯磺酰化磁性微球。运用本发明的技术所制备对甲苯磺酰化磁性微球对抗体的偶联率高，其偶联后得到的化学发光免疫检测磁珠粒径均匀磁响应性好，用于发光检测的准确度高，热稳定性高，能够满足临床使用需求。

技术领域

本发明属于功能材料和分析技术领域，具体涉及化学发光免疫磁球及其制备方法。

背景技术

化学发光免疫磁性微球，其采用的磁性微球作为载体，与其它固相萃取材料相比，磁性材料具有超顺磁特性、尺寸小、表面积大等优点，它在溶液中可以充分与分析物接触以保证高效吸附。磁性材料能够快速与母液分离；磁性材料也可以直接用于含固体颗粒、微生物或者粘度大的复杂样品前处理，中间不需要过滤和离心等步骤。然而，单纯的磁性材料其吸附能力有限，需要在其表面进行适当的修饰以提高选择性和吸附性能。常用的修饰基团包括C18、苯基、氨基、聚合物，然而对其进行修饰，往往造成其偶联抗原或抗体的效率不高，在后续的检测和分析过程中，准确度不高，热稳定性欠缺。

发明内容

本发明制备的化学发光免疫磁性微球，而且偶联抗原抗体后的免疫磁珠用于化学发光检测准确度高，热稳定性佳。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

本发明的一方面，提供一种化学发光免疫磁性磁球，包括由表面化学修饰有对甲苯磺酰化基团的磁性微球，同抗原或抗体偶联所得。

进一步的，所述磁性微球为聚苯乙烯磁性微球。

本发明的另一方面，提供一种化学发光免疫磁球的制备方法，包括以下步骤：

S1、聚合以获得表面具有多孔结构的聚苯乙烯的乳胶粒子；

S2、将S1步骤得到的乳胶粒子与亚铁盐的水溶液混合，通过原位还原法制备磁性复合体；

S3、将磁性复合体经羟基化改性，得到羟基化磁性微球；

S4、将羟基化磁性微球与对甲苯磺酰氯反应，即得到对甲苯磺酰化磁性微球；

S5、将所述对甲苯磺酰化磁性微球与抗原或抗体混合，反应6～8h，得到所述化学发光免疫磁球。

具体的，所述S1步骤包括以下步骤：

S11、种子乳液的制备

取乳化剂、蒸馏水、单体有机相和引发剂聚合得到种子乳液；

S12、单体的预乳化

将乳化剂与单体有机相混合，充分搅拌至体系呈现稳定的乳液，即得到单体的预乳化液；

S13、乳胶粒子的制备

将引发剂和单体的预乳化液同时滴入到种子乳液中；升高温度至84～86℃熟化处理；降低温度至40～45℃，调节pH呈弱碱性，得到乳液；将所得乳液过筛，即可得到聚苯乙烯的乳胶粒子。

具体的，所述S11的步骤中，单体有机相:水:乳化剂:引发剂的体积配比为100:(500～1500):(1～3):(1～5)。

具体的，所述S3步骤包括以下步骤：

S31、磁性复合体与环氧基聚硅氧烷混合，在冰浴并搅拌条件下，匀速滴加冰醋酸，滴加完毕后，搅拌反应；