[发明专利]一种紫灯片HPLC指纹图谱建立方法有效

专利信息
申请号: 202010876262.X 申请日: 2020-08-25
公开(公告)号: CN111999415B 公开(公告)日: 2023-05-12
发明(设计)人: 夏淑英;旷春兰;肖绍川;康爱华;贾天亮;刘厚权;刘鹏飞;张金良;张小梅;康兴东 申请(专利权)人: 江西普正制药股份有限公司
主分类号: G01N30/06 分类号: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
代理公司: 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 代理人: 姜艳华
地址: 343121 江西省吉安*** 国省代码: 江西;36
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摘要:
搜索关键词: 一种 紫灯片 hplc 指纹 图谱 建立 方法
【权利要求书】:

1.一种紫灯片的HPLC指纹图谱检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1、供试品溶液的制备:

精密称取紫灯片内容物1g,置具塞锥形瓶中,精密加入水饱和的正丁醇25~50ml,称重,回流提取2~3小时,取出,放冷,用水饱和的正丁醇补足减失的重量,滤过,精密量取续滤液15~25ml,置分液漏斗中,用氨试液洗涤2次,每次25ml,弃去氨试液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇溶解并浓缩至10~15ml,用微孔滤膜滤过,取续滤液,即得供试品溶液;

步骤2、对照品溶液制备:

取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品各5~15mg,分别置50ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液,即得对照品溶液;

步骤3、色谱条件:

ODS C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱;流动相A为乙腈;流动相B为水溶液;检测波长203nm;柱温:10~30℃;流速:1.0ml.min-1,洗脱程序为梯度洗脱程序;其中梯度洗脱的程序如下体积比浓度配置进行:

步骤4、测定:

精密吸取供试品溶液10~20μl注入液相色谱仪,照高效液相色谱法测定,得到紫灯片的指纹图谱。

2.按照权利要求1所述一种紫灯片的HPLC指纹图谱检测方法,其特征在于:

步骤1、供试品溶液制备:

精密称取紫灯片内容物1g,置具塞锥形瓶中,精密加入水饱和的正丁醇50ml,称重,回流提取2小时,取出,放冷,用水饱和的正丁醇补足减失的重量,滤过,精密量取续滤液25ml,置分液漏斗中,用氨试液洗涤2次,每次25ml,弃去氨试液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇溶解并浓缩至10ml,用微孔滤膜滤过,取续滤液,即得供试品溶液;

步骤2、对照品溶液制备:

取人参皂苷Rg1对照品10mg、人参皂苷Rb1对照品各7.5mg,分别置50ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液,即得对照品溶液;

步骤3、色谱条件:

ODS C18 4.6mm×250mm,5μm色谱柱;流动相C为乙腈;流动相A为水溶液;检测波长203nm;柱温:20℃;流速:1.0ml.min-1

步骤4、测定:

精密吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪,照高效液相色谱法测定,得到紫灯片的指纹图谱。

3.按照权利要求2所述一种紫灯片的HPLC指纹图谱检测方法,其特征在于:紫灯片指纹图谱中有11个特征共有峰,其中人参皂苷Rg1为6号峰、保留时间为25.5424分钟,人参皂苷Rb1为8号峰、保留时间为33.9732分钟。

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