[发明专利]一种菊花中五种重要药用成分含量的UPLC-MS/UV检测方法

说明书

本发明公开了一种菊花中五种重要药用成分含量的UPLC‑MS/UV检测方法。本发明使用甲醇/水(7/3,v/v)溶液为溶剂，对药用菊花中五种重要药用成分进行液液萃取，超声提取40min，离心取上清，过膜后，对五种重要药用成分的质谱信息和光谱信息进行同时采集，采用外标法进行定量。该检测方法前处理过程简易，不需要繁琐的前处理提纯步骤。该发明可用于对菊花中五种重要药用成分进行定量分析。

技术领域

本发明涉及一种菊花中五种重要药用成分含量的UPLC-MS/UV检测方法。

背景技术

菊花为我国的传统名花之一，具有2500多年的栽培历史，品种达3000种以上，包括药用菊、茶用菊和观赏菊。其中，由于产地和加工方式的不同，药用菊花现已形成亳菊、滁菊、贡菊、杭菊、怀菊等不同栽培品种类型。2015年版《中国药典》(一部)载有：药用菊花是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序，具有散风清热、平肝明目、清热解毒功效，用于治疗风热感冒、头痛眩晕、目赤肿痛、眼目昏花，疮痈肿毒等。《神农本草经》亦称菊花“久服利血气，轻身，耐老延年”。

不同栽培品种的菊花，其药效成分的含量和功能不同。菊花作为一种药食同源植物，其功能部位化学成分分析表明，药用菊花富含绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸3个药效指标成分，以及木犀草素、芹菜素、槲皮素、金合欢素等黄酮苷元类化合物，这些化合物常作为药用菊花质量评价的主要指标。现代药理学研究发现，药用菊花具有抗氧化、抗菌、抗病毒等功效，对心血管疾病、糖尿病及细菌、病毒感染和肿瘤有一定疗效。其中，绿原酸具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、保肝和降糖等功能；木樨草苷具有抗氧化、抗菌、抗病毒等作用；3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸是菊花中最有效的抗氧化成分，具有保肝、抗病毒、降糖等功能；木犀草素和芹菜素作为药用菊花黄酮类化合物的主要效应成分，均有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗诱变、降血脂及降胆固醇等的功效作用，二者还是口服菊花提取物的主要药用成分。此外，药用菊花中还含有多糖、氨基酸、微量元素等有效成分。因此，药用菊花兼可药用、饮用、食用，适于开发绿色功能性药品、食品和保健品。

进行不同产地药用菊花功能成分含量的检测，可为药用菊花的质量鉴定、品种筛选及其品质综合评价体系构建提供科学依据。

发明内容

本发明的目的是提供一种菊花中五种重要药用成分含量的UPLC-MS/UV检测方法。

本发明提供的对菊花中式I-式V所示化合物进行含量测定的方法，包括：

1)将菊花整朵摘下，烘干，磨碎，得到磨碎后的菊花样品，加入提取剂，超声，离心，收集上清液过滤，得到提取液；

2)用液相色谱和质谱联用的方法，对步骤1)所得提取液中式I-式V所示化合物的含量进行定量分析，完成所述菊花中式I-式V所示化合物的含量测定；

所述式I-式V的结构式如下：

所述式I为绿原酸(Chlorogenic acid)；

所述式II为3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(3,5-Dicaffeoyl quinic acid)；

所述式III为木樨草苷(Cynaroside)；

所述式IV为木犀草素(Luteolin)；

所述式V为芹菜素(Apigenin)。

上述方法的步骤1)烘干步骤中，烘干方法为蒸青烘干法；具体为在100～105℃蒸汽杀青3min，50℃恒温烘至含水量在12％以下；

所述磨碎步骤中，磨碎后的目数为60-80目；

所述提取剂由甲醇和水组成；所述甲醇和水的体积比具体为2.3-2.7：1；具体为7:3；