[发明专利]一种制备和鉴定雄性配子体不育的方法有效

专利信息
申请号: 202010879337.X 申请日: 2020-08-27
公开(公告)号: CN112251459B 公开(公告)日: 2023-01-20
发明(设计)人: 张毅;陈云;杜双林 申请(专利权)人: 云南大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 代理人: 王贵君
地址: 650091 云*** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 一种 制备 鉴定 雄性 配子体 不育 方法
【权利要求书】:

1.制备和鉴定雄性配子体不育的方法,其特征在于:具体步骤如下:

(1)构建一个包括可能的雄配子体可育基因的下调元件和花青素调控相关序列的植物表达载体;

(2)将上述表达载体转入一个花青素缺失的无色材料中,选出具有花青素颜色的阳性株作父本同无色母本杂交,并让阳性株自交;

(3)调查杂交F1代具有色个体同无色个体的比例,如果全部个体无色,说明候选基因为配子体不育相关基因,转基因阳性株为雄性配子体不育材料;调查自交T1代中花青素色的分离比例,如果紫色:无色比例符合1:1,进一步确证候选基因为雄性配子体不育相关基因,转基因阳性株为雄性配子体不育材料。

2.根据权利要求1所述制备雄性配子体不育的方法,其特征在于:所述雄性配子体功能相关基因为水稻Loc_Os05g40740基因。

3.根据权利要求1所述制备雄性配子体不育的方法,其特征在于:所述花青素合成调控必需基因为水稻OsMYB76基因或水稻OsMYB76基因的改造后基因OsMYB76R,水稻OsMYB76的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,改造后基因OsMYB76R的核苷酸如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求1所述制备雄性配子体不育的方法,其特征在于:所述雄性配子体功能相关基因的下调表达元件由花粉特异启动子调控表达,所述花粉特异启动子为水稻Loc_Os05g40740基因的启动子,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

5.根据权利要求1所述制备雄性配子体不育的方法,其特征在于:所述下调表达元件为RNAi干涉元件,其干涉元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

6.根据权利要求1所述制备雄性配子体不育的方法,其特征在于:所述花青素性状为芽鞘紫线。

7.根据权利要求1-6任一项所述方法在分离、鉴定雄性配子体不育相关基因,制备雄性配子体不育中方面的应用。

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