[发明专利]检测呼吸道相关病毒并分型的组合物、试剂盒、用途及方法

权利要求书

1.一种能够检测呼吸道相关病毒并分型的组合物，所述组合物同时包括：

第一组：

如SEQ ID NO:1所示的新型冠状病毒2019-nCoV上游引物、如SEQ ID NO:2所示的新型冠状病毒2019-nCoV下游引物，和如SEQ ID NO:3所示的新型冠状病毒2019-nCoV探针；

如SEQ ID NO:4所示的乙型流感病毒上游引物、如SEQ ID NO:5所示的乙型流感病毒下游引物，和如SEQ ID NO:6所示的乙型流感病毒探针；和

如SEQ ID NO:7所示的呼吸道腺病毒上游引物、如SEQ ID NO:8所示的呼吸道腺病毒下游引物，和如SEQ ID NO:9所示的呼吸道腺病毒探针；以及

第二组：

如SEQ ID NO:10所示的甲型流感病毒上游引物和如SEQ ID NO:11所示的甲型流感病毒下游引物；

如SEQ ID NO:12所示的副流感病毒上游引物和如SEQ ID NO:13所示的副流感病毒下游引物；

如SEQ ID NO:14所示的呼吸道合胞病毒上游引物和如SEQ ID NO:15所示的呼吸道合胞病毒下游引物；和

如SEQ ID NO:16所示的偏肺病毒上游引物和如SEQ ID NO:17所示的偏肺病毒下游引物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物的第一组进一步包括如SEQ ID NO:18所示的内标上游引物、如SEQ ID NO:19所示的内标下游引物，和如SEQ ID NO:20所示的内标探针。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中，第一组的探针上带有荧光报告基团，第二组的每一对的上游引物和/或下游引物带有荧光报告基团，并且第一组内探针的荧光报告基团彼此互不相同且互不干扰，并且第二组内每一对的荧光报告基团彼此互不相同且互不干扰。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中，如SEQ ID NO:3所示的新型冠状病毒2019-nCoV探针的荧光报告基团为FAM；如SEQ ID NO:6所示的乙型流感病毒探针的荧光报告基团为HEX；如SEQ ID NO:9所示的呼吸道腺病毒探针的荧光报告基团为ROX；如SEQ ID NO:10所示的甲型流感病毒上游引物的荧光报告基团为FAM；如SEQ ID NO:12所示的副流感病毒上游引物的荧光报告基团为HEX；如SEQ ID NO:14所示的呼吸道合胞病毒上游引物的荧光报告基团为ROX；如SEQ ID NO:16所示的偏肺病毒的荧光报告基团为CY5。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的组合物，其中，所述组合物的各成分存在于同一个包装中。

6.权利要求1～5中任一项所述的组合物在制备检测呼吸道相关病毒并分型的试剂盒中的用途。

7.一种用于检测呼吸道相关病毒并分型的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1～5中任一项所述的组合物。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括核酸释放试剂、dNTP、逆转录酶、DNA聚合酶、PCR缓冲液以及Mg²⁺中的至少一种。

9.根据权利要求7所述的试剂盒，其中，所述组合物中引物的用量为50～150nM；所述组合物中探针的用量为25～75nM。

10.一种用于检测呼吸道相关病毒的方法，所述方法包括以下步骤：

1)释放待测样本的核酸；优选地，所述样本为咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血液；

2)使用如权利要求1～5中任一项所述的组合物对步骤1)获得的核酸进行荧光定量PCR；

3)获得并分析结果。