[发明专利]检测呼吸道相关病毒并分型的组合物、试剂盒、用途及方法

说明书

本发明涉及分子生物学检测领域，更具体地，涉及新型冠状病毒2019‑nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒、呼吸道合胞病毒和偏肺病毒的检测；与此同时，还提供了包含所述组合物的试剂盒，所述组合物的用途，以及用于检测呼吸道相关病毒并分型的方法。本发明的组合物结合荧光探针法和熔解曲线法，能够在一管同时检测呼吸道相关病毒并进行分型，其成本低，通量高，耗时少，极大的提升了检测效率，并且操作简便，单管操作避免由于样本间交叉引起的假阳性和环境污染。

技术领域

本发明属于分子生物学检测领域，更具体的，更具体地，涉及新型冠状病 毒2019-nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒、 呼吸道合胞病毒和偏肺病毒的检测并分型。

背景技术

呼吸系统感染性疾病大多数是临床上的常见病、多发病。引起呼吸道疾病 的病原体种类很多，通过临床症状和常规的实验室检测很难鉴别确定所感染的 病原体种类。呼吸道病毒可以通过空气传播，引起急性呼吸道病的的病原体具 有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，可引起广泛的急性上呼吸道 和下呼吸道疾病，严重危害人类的健康。常见的呼吸道病毒包括：

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)，冠状病毒是一个大型病毒家族，在此 之前已知有6种可以感染到人类，如可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS) 和严重急性呼吸综合征(SARS)等。新型冠状病毒SARS-CoV-2是以前从未在 人体中发现的冠状病毒新毒株，该病毒在分类学上属于冠状病毒科 (Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)中的β类型冠状病毒，具有囊膜 和刺突细胞学特征基因组为线性单股正链的RNA((+)ssRNA)病毒。

流行性感冒病毒(influenza virus)，简称流感病毒，是一种造成人类及动 物患流行性感冒的RNA病毒，人流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C) 三型，是流行性感冒(流感)的病原体。禽流感(avian influenza；AI)是禽流 行性感冒的简称，它是一种由甲型流感病毒的某种亚型(也称禽流感病毒)引 起的传染性疾病。在分类学上，流感病毒属于正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)， 流行性感冒病毒属(Influenza virus)，它会造成急性上呼吸道感染，并借由空 气迅速的传播，在世界各地常会有周期性的大流行。

呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)属副黏病毒科肺炎属 的RNA病毒，临床研究表明，呼吸道合胞病毒是引起病毒性肺炎的最常见的 病原，多见于三岁以下的婴幼儿，主要症状有高热、鼻炎、咽炎及喉炎，以后 表现为细支气管炎及肺炎。少数病儿可并发中耳炎、胸膜炎及心肌炎等。成人 和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。

腺病毒(Adenoviruses，HAdv)属于腺病毒科(Adenoviridae)，根据免疫 学、生物学、生物化学特性不同，将其分为A～G 7个亚种，共有52个血清型， 不同的血清型有不同的器官亲和性并引起相应的临床表现，对呼吸道、胃肠道、 尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染。

副流感病毒(Human Parainfluenza viruse，HPIVs)是单链的RNA病毒，常常 引起儿童下呼吸道感染，其致病性仅次于RSV。与RSV一样，人类副流感病 毒可以造成反复发作的上呼吸道感染。它也能造成严重的反复感染的下呼吸道 疾病，特别是在老年人中和有免疫缺陷人群中。

人类偏肺病毒(Human Metapneumovirus，hMPV)是近年来发现的一种与 人类呼吸道感染之间存在病原学关系的新型副粘液病毒。2001年荷兰学者首次 报道了HMPV，随后世界各国研究表明，该病毒在世界范围内普遍存在，并已 经在人类中传播了至少50年。HMPV被认为是目前导致呼吸道感染的第二大 原因，且与RSV属于同一家族，后者是人类呼吸道感染的第一大病因。HMPV 与近10％的病因不明的呼吸道感染有关，可引起相当一部分婴儿、儿童和成人 的上、下呼吸道感染。