[发明专利]杂交瘤细胞株及其制备方法和应用、单克隆抗体及其应用有效
申请号: | 202010880376.1 | 申请日: | 2020-08-27 |
公开(公告)号: | CN111996173B | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 刘先成;于蕾;曾映;胡明龙;杨宁 | 申请(专利权)人: | 深圳普门科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/26;G01N33/577;G01N33/74 |
代理公司: | 广东恩典律师事务所 44549 | 代理人: | 张绍波;李健 |
地址: | 518110 广东省深圳市龙华区观湖街道观城*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杂交瘤 细胞株 及其 制备 方法 应用 单克隆抗体 | ||
1.一种杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No:61044或者所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No:61043。
2.一种单克隆抗体,其特征在于,由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌。
3.根据权利要求2所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体由保藏号为GDMCCNo:61044的所述杂交瘤细胞株分泌,所述单克隆抗体能够识别氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的多肽片段。
4.根据权利要求2所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体由保藏号为GDMCCNo:61043的所述杂交瘤细胞株分泌,所述单克隆抗体能够识别氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的多肽片段。
5.一种杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
采用胰岛素原免疫小鼠,获得免疫后的小鼠;及
提取所述免疫后的小鼠的脾细胞,并与小鼠骨髓瘤细胞融合,筛选,得到杂交瘤细胞株;
所述筛选的步骤包括:采用多肽并按照ELISA方法对融合后的细胞进行筛选,得到所述杂交瘤细胞株,其中,所述多肽包括第一片段及第二片段中的至少一个,所述第一片段如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,所述第二片段如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。
6.根据权利要求5所述的杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于,所述采用多肽并按照ELISA方法对融合后的细胞进行筛选的步骤包括:
采用胰岛素并按照ELISA方法对融合后的细胞进行筛选,得到阳性细胞;及
采用所述第一片段及所述第二片段中的一个并按照ELISA方法对所述阳性细胞进行筛选,得到所述杂交瘤细胞株。
7.权利要求1所述的杂交瘤细胞株、或者权利要求2~4任一项所述的单克隆抗体、或者权利要求5~6任一项所述的杂交瘤细胞株的制备方法制备得到的杂交瘤细胞株在制备胰岛素检测试剂、胰岛素检测试剂盒或者胰岛素检测装置中的应用。
8.一种胰岛素检测试剂盒,其特征在于,包括:第一抗体和第二抗体,所述第一抗体含有由保藏号为GDMCC No:61044的杂交瘤细胞株及保藏号为GDMCC No:61043的杂交瘤细胞株中的一个分泌的单克隆抗体,所述第二抗体含有由保藏号为GDMCC No:61044的杂交瘤细胞株及保藏号为GDMCC No:61043的杂交瘤细胞株中的另一个分泌的单克隆抗体。
9.根据权利要求8所述的胰岛素检测试剂盒,其特征在于,所述第一抗体及所述第二抗体中的一个为标记物标记的抗体,所述标记物包括发光标记物。
10.一种胰岛素检测装置,其特征在于,包括权利要求2~4任一项所述的单克隆抗体或者权利要求8~9任一项所述的胰岛素检测试剂盒。
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