[发明专利]一种长效重组犬干扰素制品及制备方法和应用

权利要求书

1.一种长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，所述方法包括将犬α-干扰素基因通过linker与犬SETD2基因连接形成编码CaIFN-α-SETD2的融合基因，将所述CaIFN-α-SETD2的融合基因经酶切、连接，导入大肠杆菌，得到重组表达菌，所述重组表达菌可诱导表达CaIFN-α-SETD2融合蛋白。

2.如权利要求1所述的长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，

所述CaIFN-α-SETD2的融合基因为如SEQ ID NO：2所示的序列。

3.如权利要求1所述的长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，

所述CaIFN-α-SETD2融合基因通过重组表达载体pET-CaIFN-α-SETD2导入所述大肠杆菌；

所述重组表达载体pET-CaIFN-α-SETD2为将所述CaIFN-α-SETD2融合基因的DNA分子替换XhoI和NdeI酶切位点之间的小片段得到的载体。

4.如权利要求1所述的长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，

所述linker的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

5.如权利要求3所述的长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，

所述大肠杆菌为BL21。

6.如权利要求1所述的长效重组犬干扰素的制备方法，其特征在于，

所述将重组表达菌接种至含30μg/ml卡那霉素的LB培养基中，37℃，200r/min振荡培养过夜；

将过夜培养的菌液按培养基量的2％接种于灭菌发酵罐中，37℃通气培养，控制发酵罐搅拌速度500～700r/min、溶氧为60～90％，pH值7.0；

待重组表达菌生长至对数生长中期，加入终浓度为1mmol/L的IPTG，37℃下诱导5h，将发酵产物纯化，得到所述CaIFN-α-SETD2融合蛋白。

7.一种长效重组犬干扰素制品，其包括稳定剂、甲基纤维素以及权利要求1-5所述方法制备的CaIFN-α-SETD2融合蛋白。

8.权利要求1-6中任一项所述的方法制备得到的长效重组犬干扰素在制备抗犬病毒病的产品的应用，所述的犬病毒是犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒或犬腺病毒病。