[发明专利]一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺

说明书

本发明公开了一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺，特别涉及降解后西番莲果皮碱提多糖在制备抗氧化剂中的应用。本研究考察了盐酸浓度、温度和时间三个酸降解条件以及酶解时间、pH值和温度三个酶降解条件对降解后西番莲果皮碱提多糖的体外抗氧化活性的影响，为西番莲果皮碱提多糖深入研究与开发奠定基础。

技术领域

本发明属于药用食品研发领域，特别涉及一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺。

背景技术

百香果又名鸡蛋果，是一种热带水果，果肉不仅含有丰富的维生素、氨基酸、有机酸等成分，而且还具有重要的生物学功能。果皮占全果的50％左右，含有黄酮类化合物，天然色素、膳食纤维、果胶等活性成分，这些成分赋予西番莲果皮提取物具有抗炎、抗氧化、抗癌、抗焦虑等生理活性。

传统的热水浸提操作方法简单，多糖的提取率及生产效率都相对较低，为提高多糖的浸提取率，会采用碱液提取多糖。由于植物细胞、细胞壁会在碱性的溶液中溶胀、破裂而使多糖溶出，可以利用碱提法提取多糖，碱液的浓度必须要适宜，才能提高多糖提取率。多糖的连接方式和异构体极为复杂，其结构具有多样性，就算是只由一种单糖形成的糖类聚合物，也会因为其分子量、空间结构等方面的不同导致生物特性的不同。多糖的聚合度越高，分子量越大，其体积就越大，越影响多糖透过细胞膜进到生物的体内发挥其作用，只有在一定范围的分子量之内才能够有较高的活性。适当的方法降解天然多糖，让天然多糖的分子键断裂，导致天然多糖分子中的大分子转变为小分子，可以让天然多糖具有更好的生物活性。本研究考察了盐酸浓度、温度和时间三个酸降解条件以及酶解时间、pH值和温度三个酶降解条件对降解后西番莲果皮多糖的体外抗氧化活性的影响，为西番莲果皮多糖深入研究与开发奠定基础。

发明内容

本发明目的是提供一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法及其降解工艺，研究降解后西番莲果皮碱提多糖在制备抗氧化剂中的作用。

本发明的技术方案是：一种西番莲果皮酶辅助碱提多糖的制备方法：选取水提后的干燥西番莲果皮，按料液比为1:25(g/mL)的比例加入蒸馏水浸泡，50℃水浴预热10min，按料液比为0.6mg/mL称取纤α-淀粉酶，混合后加入预热好的溶液，将反应溶液的pH值调至5.0，50℃水浴40min，反应期间需要每隔10分钟调节一次pH值，目的是为了避免pH值会发生变化。反应完成后100℃水浴10min，目的是使酶失活。冷却至室温，用0.75mol/L的NaOH溶液调节pH值至10.0，40℃水浴碱解60min，碱解期间每隔10分钟调一次pH值。碱解后离心(4000r/min，15min)，取上清液，浓缩，再加入3倍体积的无水乙醇醇沉12小时。醇沉后离心(4000r/min，15min)，沉淀，冷冻干燥，得到西番莲果皮碱提多糖。

将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，在反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度为0.4mol/L的条件下降解，反应结束后，调至中性，流水透析48h，经浓缩后冻干得盐酸降解后西番莲果皮碱提多糖。

将碱提多糖配制成5mg/mL的溶液，选用α-淀粉酶降解碱提多糖，酶活力为150U/mL。在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min的条件下对碱提多糖降解，反应结束后，置于100℃的水浴锅中10min，离心(9000r/min，10min)，取上清液，冻干得酶解西番莲果皮碱提多糖。

优选的是：反应时间为60min、反应温度为70℃、盐酸浓度0.4mol/L，流水透析48h。

优选的是：酶活力为150U/mL，在pH值为4、反应温度为40℃、反应时间60min。

本发明还提供了所述降解后碱提多糖在制备抗氧化剂中的应用。

附图说明

图1为碱提多糖在不同盐酸浓度的条件下降解及其产物对羟基自由基清除率的影响；