[发明专利]一种医用硅酮疤痕凝胶贴的微生物限度检查方法

权利要求书

1.一种医用硅酮疤痕凝胶贴的微生物限度检查方法，其特征在于，步骤如下：

(1)菌液制备

a、分别选取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌适量，往其中加入生理盐水进行稀释制备相对应的菌悬液；

b、取适量的黑曲霉，然后往其中加入0.05％吐温80的生理盐水，洗下黑曲霉作为原液，然后在继续补入0.05％吐温80的生理盐水将原液进行稀释，制备出菌悬液；

(2)供试液制备

取适量的医用硅酮疤痕凝胶，加入0.05％吐温生理盐水，然后进行震荡一段时间后，配制成1:10-20的供试液备用；

(3)需氧菌的检查方法

a、试验组：分别取步骤(2)配制的供试液适量，然后加入生理盐水进行稀释，再采用薄膜过滤，用生理盐水冲洗不低于2次，在最后一次冲洗液中加入步骤(1)配制的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌悬液。取出滤膜，菌面朝上贴在胰酪大豆胨琼脂培养基上，保持温度在30-33℃，培养3-5天后观察结果；

b、菌液组：用生理盐水替代供试液，按实验组操作加入适的量菌悬液，方法同试验组；

c、供试液对照组：取供试液适量，以生理盐水替代菌悬液，其他同试验组操作同试验组；

(4)控制菌检查方法

a、金黄色葡萄球菌检查：取适量的步骤(1)所配制的供试液，加入生理盐水，然后进行薄膜过滤，用生理盐水冲洗不低于2次后，取滤膜加入至LTSB培养基中，向其中加入适量的步骤(1)所配制的金黄色葡萄球菌悬液，保持温度在30-33℃，培养1天后，取培养物接种于甘露醇氯化钠琼脂培养基上，温度控制在30-33℃，培养一天；

b、铜绿假单胞菌检查：取滤膜加入至适量的LTSB培养基中，向其中加入适量的步骤(1)所配制的铜绿假单胞菌菌液，保持温度在30-33℃，培养1天后，取培养物接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基上，温度控制在30-33℃，培养一天；

c、阳性对照组：分别取适量步骤(1)所配制的金黄色葡萄球菌菌悬液、铜绿假单胞菌菌悬液，将其分别接种至LTSB培养基中，其他同试验组操作同试验组同步骤a、或步骤b；

d、阴性对照组：分别取适量的生理盐水，将其分贝接种至LTSB培养基中，其他同试验组操作同试验组同步骤a、或步骤b；

e、供试液组：分别取适量的步骤(1)所配制的供试液，在不加入菌悬液的情况，其他同试验组操作同试验组同步骤a、或步骤b；

(4)对数据进行分析，计算微生物回收率：

回收率＝(试验组菌落数-供试液对照组菌落数)*100/菌液组菌落数。

2.根据权利要求1所述的一种医用硅酮疤痕凝胶贴的微生物限度检查方法，其特征在于，步骤(1)所制备的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌菌悬液为含菌数在0～100cfu/mL的菌悬液。

3.根据权利要求1所述的一种医用硅酮疤痕凝胶贴的微生物限度检查方法，其特征在于，步骤(1)所制备的黑曲霉菌悬液为含菌数为0～100cfu/mL的菌悬液。