[发明专利]PNA在检测DNA裂解片段中的应用

权利要求书

1.PNA在检测DNA裂解片段中的应用。

2.一种定性检测DNA裂解片段的方法，其步骤包括：

(1)设计引物组和PNA探针组序列，所述引物组和PNA探针组的核苷酸序列部分重叠，重叠部分与待检测的DNA裂解片段的端部核酸序列互补；PNA探针和扩增引物重叠序列的碱基数为9至11个，；

(2)以待测样品为模板，加入引物组和PNA探针组进行PCR反应，然后电泳查看结果，能观察到核酸条带说明存在待检测的DNA裂解片段。

3.根据权利要求2所述的定性检测DNA裂解片段的方法，其特征在于：所述引物组的引物为单碱基错配引物，错配位点位于PNA探针和核酸扩增引物重叠序列的中间。

4.一种实时检测DNA裂解片段的方法，其步骤包括：

(1)设计引物组、PNA探针组和TaqMan MGB探针序列，所述引物组和PNA探针组的核苷酸序列部分重叠，重叠部分包括待检测的DNA裂解片段的端部核酸序列；

(2)以待测样品为模板，加入引物组、PNA探针组、TaqMan MGB探针进行荧光定量PCR，标准曲线法进行定量分析，分析扩增结果。

5.根据权利要求4所述的实时检测DNA裂解片段的方法，其特征在于：所述引物组的引物为单碱基错配引物，错配位点位于PNA探针和核酸扩增引物重叠序列的中间。

6.一组用于定性检测SRY基因裂解片段的引物和PNA探针组合，包括：

SRY-PNA-F：H2N-AAAGCTGTAACTCTA-CONH2

SRY-PF1m：CTGTAAATCTAAGTATCAGTGTG

SRY-PNA-R：H2N-TCCCAGCTGCTTGCT-CONH2

SRY-PR1m：AGCTGCATGCTGATCTCTGAG。

7.一组用于实时检测SRY基因裂解片段的引物和PNA、TaqMan探针组合，包括：

SRY-PNA-F：H2N-AAAGCTGTAACTCTA-CONH2

SRY-PF1m：CTGTAAATCTAAGTATCAGTGTG

SRY-PNA-R：H2N-TCCCAGCTGCTTGCT-CONH2

SRY-PR1m：AGCTGCATGCTGATCTCTGAG

TaqMan-MGB-SRY：AAGCGACCCATGAA。

8.一组用于定性检测Maspin基因裂解片段的引物和PNA探针组合，包括：

Maspin-PNA-F：H2N-CCAACGTGTCTGAGA-Lys-CONH2

Maspin-PF1m：GTGTCAGAGAAATTTGTAGTGTTAC

Maspin-PNA-R：H2N-CATACGTACAGACAT-Lys-CONH2

Maspin-PR1m：GTACAAACATGCGTACGGC。

9.一组用于实时检测Maspin基因裂解片段的引物和PNA、TaqMan探针组合，包括：

Maspin-PNA-F：H2N-CCAACGTGTCTGAGA-Lys-CONH2

Maspin-PF1m：GTGTCAGAGAAATTTGTAGTGTTAC

Maspin-PNA-R：H2N-CATACGTACAGACAT-Lys-CONH2

Maspin-PR1m：GTACAAACATGCGTACGGC

TaqMan-MGB-Maspin：CGAATATTTCACCTTCC。