[发明专利]一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：包括用于检测CYP2C19基因的引物对、探针和抑制剂，PCR反应液、阳性质控品、阴性质控品，所述引物对具体检测的是CYP2C19基因的rs4244285位点和rs4986893位点的多态性；

用于检测CYP2C19基因的引物对、探针和抑制剂包括：

用于检测CYP2C19*2(681GA)待测位点的引物对、探针和抑制剂：

P227P-WF:CCACTATCATTGATTATTTCCCG SEQ IQ NO.1

P227P-MF:CCACTATCATTGATTATTTCCCA SEQ IQ NO.2

P227P-R:TTCTCCATTTTGATCAGGAAGCAAT SEQ IQ NO.3

P227P-P:FAM-CCATAACAAATTACTTAAAAACCTTGCTT-TRAMA SEQ IQ NO.4

P227P-WB:CCACTATCATTGATTATTTCCCAGGAACC-ddC SEQ IQ NO.5

P227P-MB:CCACTATCATTGATTATTTCCCGGGAACC-ddC SEQ IQ NO.6；

和用于检测CYP2C19*3(636GA)待测位点的引物对、探针和抑制剂：

W212X-WF:ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGG SEQ IQ NO.7

W212X-MF:ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGA SEQ IQ NO.8

W212X-R:TTTCCAGATATTCACCCCATGGCTGTCT SEQ IQ NO.9

W212X-P:VIC-TCTGGGAAATCCAAAATTCTATATTGACC-TRAMA SEQ IQ NO.10

W212X-WB:AACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGAATC-ddC SEQ IQ NO.11

W212X-MB:AACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGGATC-ddC SEQ IQ NO.12。

2.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：所述探针5’端荧光基团为适用于荧光定量PCR分析的FAM、VIC、HEX、cy5或者ROX荧光报告基团，3’端的淬灭基团为适用于荧光定量PCR的TAMRA、BHQ1、BHQ2、MGB或者Dabcy1荧光淬灭基团。

3.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：所述抑制剂3’端采用C3 spacer、磷酸化、硫代、MGB或双脱氧胞苷(ddC)修饰。

4.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液包含了PCR反应所需要的热启动taq酶、缓冲液、镁离子、dNTP物质。

5.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：所述阳性质控品的获取方法为：根据NCBI数据库公布的CYP2C19*2和CYP2C19*3基因序列进行质粒构建合成序列基因片段，然后把该片段插入到T载体中，利用大肠杆菌DH5α菌株转化并提取质粒，将各质控品质粒等比例混合即为所述阳性质控品。

6.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒，其特征在于：所述阴性质控品为DEPC处理过的去离子水。