[发明专利]一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒及使用方法有效
申请号: | 202010886407.4 | 申请日: | 2020-08-28 |
公开(公告)号: | CN111961718B | 公开(公告)日: | 2022-03-11 |
发明(设计)人: | 颜蓉;韩勋领;罗锋 | 申请(专利权)人: | 重庆浦洛通基因医学研究院有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 重庆坤源衡泰律师事务所 50255 | 代理人: | 张迅 |
地址: | 400711 重庆市北碚*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氯吡格雷 用药 基因 检测 试剂盒 使用方法 | ||
1.一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:包括用于检测CYP2C19基因的引物对、探针和抑制剂,PCR反应液、阳性质控品、阴性质控品,所述引物对具体检测的是CYP2C19基因的rs4244285位点和rs4986893位点的多态性;
用于检测CYP2C19基因的引物对、探针和抑制剂包括:
用于检测CYP2C19*2(681GA)待测位点的引物对、探针和抑制剂:
P227P-WF:CCACTATCATTGATTATTTCCCG SEQ IQ NO.1
P227P-MF:CCACTATCATTGATTATTTCCCA SEQ IQ NO.2
P227P-R:TTCTCCATTTTGATCAGGAAGCAAT SEQ IQ NO.3
P227P-P:FAM-CCATAACAAATTACTTAAAAACCTTGCTT-TRAMA SEQ IQ NO.4
P227P-WB:CCACTATCATTGATTATTTCCCAGGAACC-ddC SEQ IQ NO.5
P227P-MB:CCACTATCATTGATTATTTCCCGGGAACC-ddC SEQ IQ NO.6;
和用于检测CYP2C19*3(636GA)待测位点的引物对、探针和抑制剂:
W212X-WF:ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGG SEQ IQ NO.7
W212X-MF:ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGA SEQ IQ NO.8
W212X-R:TTTCCAGATATTCACCCCATGGCTGTCT SEQ IQ NO.9
W212X-P:VIC-TCTGGGAAATCCAAAATTCTATATTGACC-TRAMA SEQ IQ NO.10
W212X-WB:AACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGAATC-ddC SEQ IQ NO.11
W212X-MB:AACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGGATC-ddC SEQ IQ NO.12。
2.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:所述探针5’端荧光基团为适用于荧光定量PCR分析的FAM、VIC、HEX、cy5或者ROX荧光报告基团,3’端的淬灭基团为适用于荧光定量PCR的TAMRA、BHQ1、BHQ2、MGB或者Dabcy1荧光淬灭基团。
3.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:所述抑制剂3’端采用C3 spacer、磷酸化、硫代、MGB或双脱氧胞苷(ddC)修饰。
4.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:所述PCR反应液包含了PCR反应所需要的热启动taq酶、缓冲液、镁离子、dNTP物质。
5.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:所述阳性质控品的获取方法为:根据NCBI数据库公布的CYP2C19*2和CYP2C19*3基因序列进行质粒构建合成序列基因片段,然后把该片段插入到T载体中,利用大肠杆菌DH5α菌株转化并提取质粒,将各质控品质粒等比例混合即为所述阳性质控品。
6.如权利要求1所述一种氯吡格雷用药基因检测试剂盒,其特征在于:所述阴性质控品为DEPC处理过的去离子水。
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