[发明专利]Map2k3或Map2k6在提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率中的用途

说明书

本发明提出了Map2k3或Map2k6在提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率中的用途、提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率的方法和试剂盒，所述方法包括：将Map2k3或Map2k6和转录因子导入哺乳动物成体细胞中进行诱导培养，获得多能性干细胞，所述干细胞诱导因子为Oct4、Klf4和Sox2，或Oct4、Klf4、Sox2和c‑Myc。本发明的方法还包括在诱导培养基中添加维生素C，其相比于不添加维生素C进一步提高了诱导多能干细胞的效率。本发明通过采用激酶类基因Map2k3或Map2k6和转录因子提高诱导多能干细胞的效率，以得到高质量的具有生殖系传递能力的诱导多能干细胞。

技术领域

本发明涉及生物领域。具体地，本发明涉及Map2k3或Map2k6在提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率中的用途。

背景技术

人胚胎干细胞(human embryonic stem cells，hESCs)是一类全能性干细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化潜能。理论上无论是在体外还是体内环境，hESCs都能被诱导分化为人体几乎所有的细胞类型。hESCs的进一步研究和应用将为移植疗法和治疗视网膜黄斑变性、帕金森、肌萎缩性侧索硬化症等疑难病症开辟新的途径。然而，由于hESCs难以获得且涉及敏感的伦理道德问题，使得hESCs的临床研究一度陷入尴尬境地而无法大规模开展。

2007年，日本Yamanaka和美国Thomson实验室首次发表了用人体细胞重编程得到人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)的方法。诱导多能干细胞成功地避开了人胚胎干细胞无法回避的伦理问题，而且具有与其相似的自我更新能力和向三个胚层分化的能力，有望成为无限获取人自体细胞的工具，用于基础生物学研究、疾病模型、药物筛选、基因矫正、细胞治疗等。而如何进一步安全、高效、低成本地进行重编程技术获得iPSCs细胞是本领域一直在不断努力达到的目标。

在诱导iPS过程中常借助于逆转录病毒、慢病毒将外源基因导入细胞，通过这种方式可以得到很高的基因转导效率，但是由于病毒序列整合到细胞的基因组中会导致基因插入突变发生，甚至具有致癌性，所以这种具有潜在危险性的基因导入方法显然不利于iPS技术在再生医学领域的应用，因此不同的研究小组采用了非整合载体来诱导iPS并取得了成功，这些载体包括腺病毒载体、普通表达载体、转座子、附加体载体、小环DNA(minicircleDNA)载体。

目前能够重编程的转录因子组合有Oct4、Klf4、Sox2、c-Myc；Oct4、Nanog、Lin28、Sox2；Sox2、Klf4和Lrh1；Oct4、bmi1等几种不同的组合以及esrrb、tbx3等与重编程相关的基因，现有的重编程方法所需要的转录因子组合需要导入的转录因子较多，而且诱导效率低下，如何利用效率较高的重编程系统，提高重编程技术的可操作性，对重编程机理进行研究，筛选高效的非整合载体以及替代转录因子的化合物，对重编程机理的研究和重编程技术的改进具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率的方法，提高重编程技术的可操作性的方法。

在本发明的一个方面，本发明提出了Map2k3或Map2k6在提高诱导成体细胞生成多能性干细胞效率中的用途。