[发明专利]标记复合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体而言，提供了一种标记复合物及其制备方法与应用。本发明提供的标记复合物制备方法，是先对目标蛋白实行预处理，将标记物与预处理过的目标蛋白进行偶联，从而得到标记复合物。该方法可以显著改善标记复合物的稳定性。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体而言，涉及一种标记复合物及其制备方法与应用。

背景技术

免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段。其中，化学发光免疫分析方法是将高灵敏的化学发光检测与高特异性的免疫反应相结合，用于检测各种半抗原，抗原，抗体，酶，激素，脂肪酸，药物和维生素等的分析技术，以标记方法的不同分为两种：化学发光标记免疫分析法和化学发光酶免疫分析法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物和鲁米诺类化合物等；常用于标记的酶标记物有碱性磷酸酶(ALP)和辣根过氧化酶(HRP)等，利用这些标记物对目标蛋白进行标记，可以形成标记复合物，该标记复合物可用于与目标蛋白特异性结合的物质的检测。

然而，现有技术中标记复合物却存在如下缺点：由于目标蛋白自身结构的原因，经过标记的形成的标记复合物存在稳定性较差的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种标记复合物的制备方法。

本发明的第二目的在于提供一种标记复合物。

本发明的第三目的在于提供标记复合物的应用。

本发明的第四目的在于提供一种化学发光免疫检测试剂盒。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种标记复合物的制备方法，将标记物与预处理过的目标蛋白进行偶联，得到标记复合物；所述预处理包括：35-60℃热处理0.5-45天。

进一步地，所述预处理包括如下(a)-(g)中任一种方案：(a)37-56℃热处理0.5-45天；(b)35-40℃热处理2-45天；(c)40-50℃处理1-30天，不包括40℃；(d)50-60℃处理0.5-10天，不包括50℃；(e)37℃处理2-45天；(f)45℃处理1-30天；(g)56℃处理0.5-10天；

可选的，将标记物与预处理过的目标蛋白进行偶联后，还包括热处理的步骤，得到标记复合物；所述热处理包括：35-60℃热处理0.5-30天；

可选的，所述热处理包括如下(A)-(G)中任一种方案：(A)37-56℃热处理0.5-30天；(B)35-40℃热处理2-30天；(C)40-50℃处理1-20天，不包括40℃；(D)50-60℃处理0.5-10天，不包括50℃；(E)37℃处理2-30天；(F)45℃处理1-20天；(G)56℃处理0.5-10天。

进一步地，将标记物与预处理过的目标蛋白通过桥连蛋白进行偶联，得到标记复合物；

可选的，桥连蛋白包括鸡卵清蛋白、明胶、钥孔血蓝蛋白、牛血清蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、多聚赖氨酸或人工合成的无功能线性多肽；

可选的，将标记物与预处理过的目标蛋白通过特异性结合对进行偶联，得到标记复合物；

可选的，特异性结合对包括生物素及其衍生物和抗生物素蛋白及其衍生物，非目标蛋白的抗原和抗体，碳水化合物和凝集素，效应物和受体分子，或者，地高辛和地高辛配基。

进一步地，标记物包括鲁米诺、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、吖啶酯、吖啶磺酰胺或三联吡啶钌或以上任一种标记物的衍生物。

进一步地，目标蛋白包括抗原或抗体。

进一步地，抗原或抗体选自感染性疾病相关抗原或抗体、心肌标志物相关抗原或抗体、或肿瘤相关标志物相关抗原或抗体。